[发明专利]一种高效好氧反硝化聚磷菌固定化小球的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种高效好氧反硝化聚磷菌固定化小球的制备方法及其应用。采用高效好氧反硝化聚磷菌，菌株命名为Acinetobacter sp.属于不动杆菌属，保藏编号为：CGMCC No.17456；挑选斜面保存好的好氧反硝化聚磷菌接种于液体LB培养基中，摇床培养得到菌悬液；然后用海藻酸钠溶液包埋获得固定化小球。本发明产品固定化小球按照20‑60g/l的投加量投加于生活污水中进行脱氮除磷处理，脱氮率均超过80％，除磷率均超过90％。本发明的固定化小球包埋的对象为单一菌株，包埋材料仅为海藻酸钠；无需硝化液回流，能够实现同步脱氮除磷，且具有较高的处理效果,操作过程简单、生产成本低、易于推广。

主权项

1.一种高效好氧反硝化聚磷菌固定化小球的制备方法，其步骤如下：①分离筛选获得包埋菌株从污水处理厂曝气池污泥中筛选出的一株具有高效脱氮除磷效果的好氧反硝化聚磷菌SWB‑26，其特征在于：菌株命名为Acinetobacter sp.，属于不动杆菌属，已于2019年03月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.17456；②好氧反硝化聚磷菌的菌悬液制备挑选1‑2环斜面保存的好氧反硝化聚磷菌SWB‑26，接种于新鲜灭菌后的液体LB培养基中，于150r/min、28℃下培养12h，将培养液置于转速为4000r/min下离心15min，倾去上清液，用生理盐水离心洗涤2‑3次，再用生理盐水稀释至OD600值为0.5左右，于4℃贮藏备用；液体LB培养基：蛋白胨10g/l，氯化钠5g/l，酵母膏10g/l，pH7.0‑7.2；③用海藻酸钠包埋获得固定化小球配制4％w/v海藻酸钠溶液，高温高压灭菌20min，冷却至室温，按照菌悬液与海藻酸钠溶液体积比为1:3的比例将二者充分混合，利用注射器将其滴入4％w/v氯化钙溶液中，边滴边搅拌，使其形成直径为2‑3mm的小球；放置于4℃冰箱中交联固化1h，用生理盐水洗涤2‑3次后获得目标产物高效好氧反硝化聚磷菌固定化小球。