[发明专利]一种EGCG在治疗绝经期焦虑症药物中的应用

摘要

本发明公开了一种EGCG在治疗绝经期焦虑症药物中的应用，首先制备去卵巢大鼠模型；对大鼠模型进行药物治疗；对大鼠模型的焦虑行为进行测定；通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；对大鼠血清和海马5‑HT、大鼠海马caspase3,caspase8,caspase9和bcl‑2表达、大鼠血清和海马IL‑6水平进行检测。本发明应用对于去卵巢大鼠(模拟绝经期妇女的动物模型)绝经期焦虑症状具有良好的改善效果。

主权项

1.一种EGCG在治疗绝经期焦虑症药物中的应用，其特征在于，所述应用包括如下实验步骤：S1，制备去卵巢大鼠模型：使用10％水合氯醛按0.3mL/100g对大鼠腹腔注射麻醉；待大鼠麻醉完全后取俯卧位；在大鼠最末肋骨下，距脊柱外侧约1cm处，剪去鼠毛，碘伏消毒，正中切口，切口为0.8～1.2cm，钝性分离至肌肉层，切开腹膜，组织镊探入切口夹出小网膜脂肪，分离并切除双侧卵巢，压迫止血后，将脂肪放入腹腔，分层缝合肌肉筋膜，缝合皮肤，碘伏消毒切口；假手术：仅剪除一小块脂肪——体积同OVX组，其他步骤与OVX手术相同；8周后，测定所有大鼠血清雌激素含量；S2，药物治疗：灌胃给予EGCG组去卵巢大鼠EGCG‑10mg/kg共8周，假手术组和去卵巢大鼠给予相同体积生理盐水；S3，焦虑行为测定：通过旷场实验和高架十字迷宫检测大鼠焦虑行为；S3‑1，旷场实验：S3‑1‑1，实验箱底部平均划为25格，中央9格为中央区域，其余16格为外周区域；S3‑1‑2，在安静且昏暗的房间，捏住大鼠距根部1/3处的尾巴轻放入实验箱中央，观察大鼠在5min内总活动路程和中央区域停留时间，红外照明，摄像头记录过程；S3‑1‑3，1次OFT后清理箱内粪便等残留物，喷洒酒精并用纱布拭擦干净，除去上一只大鼠的气味，避免影响下一只大鼠实验结果；S3‑2，高架十字迷宫：每只大鼠置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中一个开放臂，释放后即开始记录5min内下述指标：进入开放臂次数、进入开放臂时间；S4，大鼠血清和海马5‑HT的检测：应用ELISA方法检测大鼠血清和海马5‑HT水平；S5，大鼠海马caspase3,caspase8,caspase9和bcl‑2表达的检测：应用Q‑PCR方法检测大鼠海马caspase3,caspase8,caspase9和bcl‑2mRNA表达；S6，大鼠血清和海马IL‑6水平检测：应用ELISA方法检测血清和海马IL‑6水平。