[发明专利]一种DNA文库及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201910354916.X | 申请日： | 2019-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN110106557A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 谢小雷 | 申请（专利权）人： | 谢小雷 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/08;C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;周全英 |
| 地址： | 510000 广东省清远市清城区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种DNA文库及其构建方法与应用，具体涉及一种用于高通量测序的DNA文库及其构建方法与应用，属于基因高通量测序技术领域。本发明DNA文库的构建方法包括以下步骤：(1)提取孕妇外周血中的游离DNA；(2)末端修复：将步骤(1)所得到的游离DNA进行末端修复，得到平末端DNA；(3)向步骤(2)所得平末端DNA中加入接头，混匀后加入预混液，再混合均匀；所述预混液包括DNA连接酶和缓冲溶液；(4)进行连接反应，得到所述DNA文库。本发明DNA文库的构建过程中，加入接头混匀后再加入预混液，这样避免了正式连接反应之前DNA连接酶作用导致的DNA‑DNA无效连接，从而提高了有效连接的效率；采用本发明所述方法构建DNA文库后，建库成功率提高至98.58％。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 预混液 连接反应 末端修复 游离DNA 平末端 混匀 高通量测序技术 应用 高通量测序 缓冲溶液 有效连接 外周血 建库 成功率 孕妇 基因 | ||
【主权项】：
1.一种DNA文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取孕妇外周血中的游离DNA；(2)末端修复：将步骤(1)所得到的游离DNA进行末端修复，得到平末端DNA；(3)向步骤(2)所得平末端DNA中加入接头，混匀后加入预混液，再混合均匀；所述预混液包括DNA连接酶和缓冲溶液；(4)进行连接反应，得到所述DNA文库。
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