[发明专利]一种基于RPA-侧流层析技术检测栗黑水疫霉的引物和探针组合及其应用在审

专利信息
申请号: 201910361142.3 申请日: 2019-04-30
公开(公告)号: CN110066885A 公开(公告)日: 2019-07-30
发明(设计)人: 戴婷婷;陆辰晨;焦彬彬;汪澳华 申请(专利权)人: 南京林业大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
代理公司: 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 代理人: 王佳妹
地址: 210037 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术(RPA‑LFD)检测栗黑水疫霉(Phytophthora cambivora)的引物及探针组合及其应用。采用所述引物及探针组合检测栗黑水疫霉(P.cambivora)的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为栗黑水疫霉(P.cambivora)的检测提供了新的技术平台,同时适用于栗黑水疫霉病菌寄主苗木、插枝等植物材料及其土壤和介质中的栗黑水疫霉(P.cambivora)进行检测。
搜索关键词: 黑水 疫霉 引物 检测 探针组合 侧流 层析技术 病菌 应用 扩增产物检测 层析试纸条 待测样本 等温扩增 技术平台 寄主苗木 交叉反应 扩增效果 特异性强 阳性对照 植物材料 灵敏性 探针组 质控区 重组酶 介导 扩增 条带 土壤
【主权项】:
1.一种基于RPA‑侧流层析技术检测栗黑水疫霉(Phytophthora cambivora)的引物和探针组合,其特征在于,所述引物序列为:正向引物RPA‑PcaRPA‑F:5’‑CCTAGGTCCACCATGGCTAAGTTTTGACCTCCAGG‑3’(SEQ ID NO:1);反向引物RPA‑PcaRPA‑R:5’‑CACTACAATTCCGAATAATCACAGTGTACACCAGTTAGCT‑3’(SEQ ID NO:2);所述探针序列为:PcaRPA‑P:5’‑TCGTTGTTGTGCCCAGAAAATTCGCACGATGAGCTGGACGGCAAG‑3’(SEQ ID NO:3)。
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