[发明专利]一种同时多层成像的光片照明显微成像方法及系统

摘要

本发明公开一种同时多层成像的光片照明显微成像系统，包括：将激光光源输出的光扩束后，照射到一个强度调制器件整形产生多个不同Z轴位置的平行片状光束。利用光路中继系统，将该光束投射到样本腔中，同时激发样本不同层面的荧光信号。利用成像物镜和样本之间介质的折射率差异，拉长成像物镜的点扩散函数，从而可以同时收集到来自不同层的荧光信号。利用3D图像重构算法对得到的不同层荧光信号的投影图进行三维重建，最终还原样本的真实三维结构。本发明通过同时多层照明和成像样本不同深度的信号，避免了系统中的机械扫描，并利用后期的图像3D重构算法，以期获得三维成像中时间分辨率数量尺度的提升。

主权项

1.一种同时多层成像的光片照明显微成像方法，其特征在于，包括以下步骤：产生照射到样本不同深度的多层片状照明光束，以激发样本不同深度的荧光；通过在成像物镜和样本之间引入折射率不匹配的介质，以拉长所述成像物镜在沿样本深度方向的成像点扩散函数，使得所述成像物镜可以收集样本不同深度的荧光信号；所述介质和成像物镜均位于样本上方，所述介质位于成像物镜和样本之间，所述介质的折射率和介质与成像物镜之间空气的折射率不匹配；基于拉长后的成像点扩散函数、多层片状照明光束的不同深度信息以及收集到的样本不同深度的荧光信号进行三维重建，得到样本的三维结构。