[发明专利]一种动物血活性复合肽的制备方法及其应用

摘要

一种动物血活性复合肽的制备方法，该方法将膜分离技术和生物定向酶切技术相结合，可以有效保护动物血清蛋白和多肽活性，制备出高活性的动物血活性肽。本发明方法剔除了传统动物血多肽提取工艺中的化学或高温变性和喷雾干燥等步骤，采用分级提取的方式，在同一工艺流程中不仅率先用5000Da超滤膜提出了血浆中本身就含有的活性肽A（血浆超滤肽），而且以经超滤浓缩后的血浆为原料直接酶切、超滤、反渗透浓缩提取出了血浆蛋白肽B（血浆蛋白酶切肽），两者复合后形成的活性多肽复合物种类更加丰富全面，而且两类活性多肽混合后可以相辅相成，起到生物协同作用，较传统工艺提取的相对单一的动物血多肽在医疗、美容、保健等领域能发挥更强的功效。

主权项

1.一种动物血活性复合肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）采集经检疫合格的健康动物血，离心机分离，收集血浆备用，或直接购买检疫合格的新鲜动物血浆；（2）将血浆经2~3个串联的0.22微米孔径的管式滤器过滤除菌；（3）将过滤除菌后血浆经截流分子量为5000Da的超滤设备超滤，分别收集透过液和截流液备用；（4）将步骤（3）中的透过液经截流分子量为100‑200Da的反渗透膜超滤浓缩至透过液原体积的1/8‑1/10，分别收集截流液和透过液，截流液即为动物血活性多肽A即血浆超滤肽，透过液可作为生产用水循环利用；（5）将步骤（3）中的截流液放入反应釜中，加入复合蛋白酶，各蛋白酶加入量以截留液体积计为200‑600U/mL，即在pＨ7.0－8.5、温度35‑50℃条件下保温4小时以上，得到动物血蛋白酶解液；（6）将步骤（5）中的酶解液，经截流分子量3000Da的超滤设备超滤，分别收集截流液和透过液，其中截流液可以加入下批料液步骤（5）中继续酶解，循环利用；（7）将步骤（6）中的透过液经截流分子量100‑200Da的反渗透膜超滤浓缩至透过液原体积的1/3‑1/5，分别收集截流和透过液，截流液即为动物血多肽B即血浆蛋白酶切肽，透过液可作为生产用水循环利用；（8）将同批次步骤（4）中的动物血多肽A和步骤（7）中的动物血多肽B混合，即为动物血活性复合肽。