[发明专利]利用5-氮杂胞嘧啶核苷提高大豆抗性丛生芽诱导效率的方法在审
| 申请号： | 201910376002.3 | 申请日： | 2019-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN110042120A | 公开（公告）日： | 2019-07-23 |
| 发明（设计）人： | 赵明哲;赵强;谢甫绨 | 申请（专利权）人： | 沈阳农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人： | 李楠 |
| 地址： | 110866 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及利用5‑氮杂胞嘧啶核苷提高大豆抗性丛生芽诱导效率的方法，属于转基因技术领域。主要技术方案如下：灭菌、萌发、配制农杆菌菌液、农杆菌侵染大豆子叶节、抗性丛生芽诱导。本发明首次在农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化体系中，使用甲基化抑制剂5‑氮杂胞嘧啶核苷对诱导抗性丛生芽的大豆子叶外植体进行去甲基化处理，提高了大豆子叶外植体的抗性丛生芽的诱导效率，这可能会导致T0代转化效率的提高。 | ||
| 搜索关键词： | 抗性 丛生芽诱导 大豆子叶节 氮杂胞嘧啶 大豆子叶 丛生芽 外植体 核苷 诱导 大豆 甲基化抑制剂 遗传转化体系 农杆菌介导 农杆菌菌液 农杆菌侵染 转基因技术 去甲基化 转化效率 灭菌 配制 | ||
【主权项】：
1.利用5‑氮杂胞嘧啶核苷提高大豆抗性丛生芽诱导效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)大豆种子灭菌(2)大豆种子萌发(3)配制农杆菌菌液(4)农杆菌侵染大豆子叶节(5)抗性丛生芽诱导将大豆的子叶近轴面向上，斜插入到抗性丛生芽诱导培养基中，26℃下光周期培养，每7天更换新的培养基，培养2周，即可得到抗性丛生芽；在诱导培养过程中，添加8‑50μM 5‑氮杂胞嘧啶核苷到抗性丛生芽诱导培养基。
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