[发明专利]一种观察外植体发生途径的方法

摘要

本发明公开了一种观察外植体发生途径的方法，即利用燕子掌的叶片和茎段作为外植体接种到含不同浓度的植物生长调节剂的MS培养基中，30天后能观察到无菌短枝型、丛生芽增殖型、胚状体发生型、器官发生型这四种不同的外植体发生途径，本发明方法具有取材方便、操作简单、观察效果好的特点。优化了教学过程，提高了教学效果；有利于学生实践能力和观察能力的培养。包括以下步骤：(1)材料的获得；(2)无菌处理；(3)无菌短枝型；(4)丛生芽增殖型；(5)胚状体发生型；(6)器官发生型Ⅰ；(7)器官发生型Ⅱ。

主权项

1.一种观察外植体发生途径的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)材料的获得：摘取燕子掌新鲜的健康叶片和茎段，在自来水下冲洗表面20min；(2)无菌处理：将冲洗完成后的叶片和茎段在超净工作台上用75％的酒精浸泡15s，浸泡完成后用无菌水冲洗1次，然后浸泡于0.1％的升汞溶液中消毒6min，消毒完成后再用无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸吸干叶片和茎段表面的水分；(3)无菌短枝型：将步骤(2)获得的茎段切成具有一对腋芽的小茎段接种至MS基本培养基上，诱导茎段生长；(4)丛生芽增殖型：将步骤(2)获得的茎段切成具有一对腋芽的小茎段接种至丛生芽增殖培养基上，诱导产生丛生芽；(5)胚状体发生型：将步骤(2)获得的叶片切成约1.0cm*1.0cm的大小接种至MS基本培养基上，诱导产生不定芽；(6)器官发生型Ⅰ：将步骤(2)获得的叶片切成约1.0cm*1.0cm的大小接种至愈伤组织诱导培养基上，诱导产生愈伤组织；(7)器官发生型Ⅱ：，将步骤(6)获得的愈伤组织切成0.5cm*0.5cm的大小接种至MS基本培养基上，诱导愈伤组织再分化形成小苗。