[发明专利]一种纯化GST-tag融合蛋白的GSH亲和层析介质及其制备方法和应用

摘要

本发明属于GST‑tag融合蛋白纯化技术领域，涉及一种纯化GST‑tag融合蛋白的GSH亲和层析介质，由表面修饰有溴化氰的层析介质和还原型谷胱甘肽通过对氨基化合物和马来酰亚胺‑琥珀酰亚胺链接物作为连接臂连接而成。本发明还提供一种纯化GST‑tag融合蛋白的GSH亲和层析介质的制备方法，通过溴化氰活化后的层析介质经对氨基化合物修饰后，再采用马来酰亚胺‑琥珀酰亚胺链接物进行修饰，最后通过偶联还原型谷胱甘肽形成GSH亲和层析介质。采用上述制备方法制得的GSH亲和层析介质用于纯化GST‑tag融合蛋白。本发明通过氨基化修饰再偶联马来酰亚胺‑琥珀酰亚胺链接物合成了高载量、高回收率、制作便捷的GSH亲和层析介质，能够广泛的运用于GST‑tag标签融合蛋白的分离和纯化工程。

主权项

1.一种纯化GST‑tag融合蛋白的GSH亲和层析介质，其特征在于：是由表面修饰有溴化氰的层析介质和能特异性结合GST‑tag融合蛋白的还原型谷胱甘肽连接而成，所述表面修饰有溴化氰的层析介质和所述还原型谷胱甘肽通过对氨基化合物和马来酰亚胺‑琥珀酰亚胺链接物作为连接臂进行连接；所述层析介质为琼脂糖微球或磁珠；所述对氨基化合物为尿素、乙二胺、丁二胺、己二胺、戊二胺、辛二胺、二氨基癸烷、二氨基十二烷中的任意一种；所述马来酰亚胺‑琥珀酰亚胺链接物为11‑马来酰亚胺基十一烷酸琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺 PEG N‑羟基琥珀酰亚胺。