[发明专利]一种快速筛选产红景天苷重组酵母菌株的方法在审
| 申请号： | 201910389523.2 | 申请日： | 2019-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN110079630A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 钱卫东;杨婵;赵鸿杰;毕家辉 | 申请（专利权）人： | 陕西科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 710021 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速筛选产红景天苷重组酵母菌株的方法：1)提取候选重组菌株基因组DNA作为模板，分别进行三轮PCR扩增，并根据电泳分析结果筛选获得同时含有TyDC、4HPAAS基因片段以及AAS基因片段的重组酵母菌株；2)将经电泳分析筛选所得的重组酵母菌株于YPD液体培养基中发酵培养，对所得发酵液进行HPLC分析，筛选得到产红景天苷重组酵母菌株。本发明简化了产红景天苷重组酵母菌株的筛选过程，具有高效、低成本、适用性强的特点，是一种具有广泛应用前景的高通量筛选方法。 | ||
| 搜索关键词： | 重组酵母菌株 红景天苷 筛选 基因片段 快速筛选 电泳分析结果 高通量筛选 基因组DNA 电泳分析 发酵培养 重组菌株 低成本 发酵液 应用 | ||
【主权项】：
1.一种快速筛选产红景天苷重组酵母菌株的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)重组菌株初筛：将经过低能离子注入介导拟南芥和红景天总基因组DNA转化处理后的出发酵母菌株接种于固体培养基上进行培养，得到转化子；提取转化子基因组DNA，以转化子基因组DNA为模板，针对TyDC基因、4HPAAS基因以及AAS基因的特异性片段分别进行三轮PCR扩增，并分别对扩增产物进行核酸电泳分析，根据电泳分析结果从转化子中筛选得到同时含有TyDC基因片段、4HPAAS基因片段以及AAS基因片段的重组酵母菌株；2)重组菌株复筛：将步骤1)筛选得到的重组酵母菌株于液体培养基中进行发酵培养，通过对发酵培养所得发酵液进行HPLC分析筛选得到产红景天苷重组酵母菌株。
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