[发明专利]基于RPA技术检测大豆花叶病毒的引物、探针、试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201910393734.3 | 申请日： | 2019-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN109943667A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 崔晓艳;秦嘉超;袁星星;陈华涛;张红梅;刘晓庆;陈景斌;陈新 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳丽 |
| 地址： | 210014 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于RPA技术检测大豆花叶病毒的引物、探针、试剂盒及应用。上游引物的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，探针的碱基序列如SEQ ID NO.3所示。除所述的引物、探针外，所述试剂盒还包括测流层析试纸条、测流层析试纸条缓冲溶液、RPA酶、RPA缓冲液、醋酸镁溶液、ddH2O、对照品中的一种或几种。本发明还公开了检测大豆花叶病毒的方法。本发明基于大豆花叶病毒CP基因设计了特定引物和探针，再应用重组酶聚合酶扩增‑测流层析的方法制备了试剂盒，敏感性高，特异性强，诊断准确，整个检测过程只需30分钟，结果的判定极其简便。 | ||
| 搜索关键词： | 探针 大豆花 试剂盒 引物 碱基序列 流层 病毒 技术检测 试纸条 应用 醋酸镁溶液 缓冲溶液 上游引物 特异性强 下游引物 对照品 缓冲液 聚合酶 重组酶 检测 扩增 制备 判定 诊断 | ||
【主权项】：
1.一种基于RPA技术检测大豆花叶病毒的引物和探针组合，其特征在于，包括：上游引物：5′‑AAGGAAGATGAATCTTCCAATGGTTGAAGGGAA‑3′；下游引物：[5’BIOTIN]ATCAAGTTCATATTCATCTTTGACTGCATTGTA‑3′；探针：[5’FAM]GTTTAGACCACTTGCTTGAGTATAAACCTAAT[THF]AAGTTGATTTATTCAA[3’BLOCK]。
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