[发明专利]一种抗ALV-J鸡λ干扰素及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201910395047.5 | 申请日： | 2019-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN110257396A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 孙京臣;张楠;冯敏;周耀红 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/19 | 分类号： | C12N15/19;C12N15/866;C12N15/65;C07K14/555;A61K38/21;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广东广信君达律师事务所 44329 | 代理人： | 杨晓松 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属于农业生物技术领域，特别涉及一种抗ALV‑J鸡λ干扰素及其制备方法与应用。本发明基因合成依次含家蚕BmNPV GP64信号肽、去除原有信号肽序列的鸡λ干扰素和6×His的核苷酸序列，然后将其和荧光报告基因片段与转移载体连接，得到重组转移载体；通过转座的方式导入E.coli BmMultiBac/△asd Sw106/PGB2Ωinv感受态细胞中，得到含有重组病毒基因组的改造菌株；然后将其侵染BmN细胞，得到重组杆状病毒；重组杆状病毒通过家蚕生物反应器表达重组蛋白，得到抗ALV‑J鸡λ干扰素。该干扰素在DF1细胞上抗病毒活性为3.45×102UI/mL，具有抗ALV‑J的功能。 | ||
| 搜索关键词： | 干扰素 重组杆状病毒 制备 家蚕生物反应器 重组病毒基因组 表达重组蛋白 农业生物技术 荧光报告基因 重组转移载体 感受态细胞 核苷酸序列 抗病毒活性 信号肽序列 基因合成 转移载体 家蚕 菌株 侵染 去除 转座 应用 细胞 改造 | ||
【主权项】：
1.一种抗ALV‑J鸡λ干扰素的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)根据家蚕BmNPV GP64信号肽基因、鸡λ干扰素及His标签的核苷酸序列，基因合成依次含家蚕BmNPV GP64信号肽基因、去除原有信号肽序列的鸡λ干扰素和6×His的核苷酸序列，命名为BmGP64sp‑ChIFN‑λ‑His；(2)将egfp基因与转移载体连接，得到重组转移载体1；(3)将步骤(1)制得的BmGP64sp‑ChIFN‑λ‑His与步骤(2)制得的重组转移载体1连接，得到重组转移载体2；(4)将步骤(3)制得的重组转移载体2转化至E.coli BmMultiBac/△asd Sw106/PGB2Ωinv感受态细胞中，得到含有重组病毒基因组的改造菌株；(5)将步骤(4)制得的含有重组病毒基因组的改造菌株侵染家蚕BmN细胞，进行病毒扩增，分离收集病毒，得到重组杆状病毒BmNPV‑ChIFN‑λ；(6)采用步骤(5)制得的重组杆状病毒BmNPV‑ChIFN‑λ接种5龄起家蚕，通过家蚕生物反应器表达重组蛋白；收集纯化重组蛋白，得到抗ALV‑J鸡λ干扰素。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南农业大学，未经华南农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910395047.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
