[发明专利]一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用

摘要

本发明属于环境监测技术领域，提供一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法及应用。在常温常压下，利用共沉淀的方法，在水相中合成沸石咪唑酯骨架‑8/石墨烯固定化天然辣根过氧化物酶的生物复合材料。ZIF‑8/GO复合材料的包埋保留HRP优异的过氧化物酶催化活性，同时增强HRP的稳定性。相对于单独的ZIF‑8矿化HRP材料来说，GO的引入增加了HRP对抗高温、有机溶剂和变性剂等复杂环境的耐受性，同时增强了HRP的存储稳定性和回收利用能力。利用DNA分子调控HRP@ZIF‑8/GO生物复合材料的过氧化物酶催化活性，建立了无标记的比色传感方法，实现了卡那霉素的特异性检测。

主权项

1.一种提高辣根过氧化物酶稳定性的固定化酶方法，其特征在于，步骤如下：(1)制备氧化石墨烯：石墨烯氧化物采用改进的Hummers化学法制备；(2)制备沸石咪唑酯骨架‑8/石墨烯复合材料固定化辣根过氧化物酶HRP@ZIF‑8/GO：GO与Zn(NO₃)₂在水中充分超声混合，形成混合液A；HRP和2‑甲基咪唑溶于水中，形成混合液B；之后，将混合液B快速倒入混合液A中，得到的混合液在室温下搅拌12‑24h；其中GO和HRP的质量比为0:50‑1:1，HRP质量、Zn(NO₃)₂的摩尔和2‑甲基咪唑的摩尔三者比例为5g:100mol:7000mol；将得到的混合物用高纯水离心清洗3‑5次，冷冻干燥12‑24h后得到粉末状物质，将其研磨并置于‑4～‑20℃的条件下冷冻保存；得到的不同GO含量的产物命名为HRP@ZIF‑8/GO‑x，其中x代表加入的GO在最终产物中的质量百分比。