[发明专利]用于甾醇发酵生产胆酸的发酵菌的定向改进方法在审
| 申请号： | 201910398193.3 | 申请日： | 2019-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN110184190A | 公开（公告）日： | 2019-08-30 |
| 发明（设计）人： | 杜琳;张亮富;宋立波;熊丹梅 | 申请（专利权）人： | 成都百代禾诗生物科技有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/36;C12P33/02 |
| 代理公司： | 成都玖和知识产权代理事务所(普通合伙) 51238 | 代理人： | 胡琳梅 |
| 地址： | 610000 四川省成都市温江区成都海峡两岸科技产业开*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能够提高发酵菌将甾醇转化为粗胆酸的转化率，并且工艺简单的用于甾醇发酵生产胆酸的发酵菌的定向改进方法。该发酵菌的定向改进方法包括以下步骤：S1、将甾醇连续倾倒在同一地点的土壤中，持续时间30d以上；S2、取甾醇倾倒出的土壤；提取菌悬液；将菌悬液滴入到培养基上培养获得菌落后，挑出单菌落；S3、将单菌落在培养基上培养，并且判断出是否为纯菌株；S4、将纯菌株分别接种到新的甾醇培养基上；判断纯菌株是否具有将甾醇发酵生产胆酸的能力；S5、纯菌株接种到新的甾醇培养基上；计算胆酸的转化率；S6、重复步骤S5，直到甾醇转化为胆酸的转化率大于或者等于90％。采用该发酵菌的定向改进方法工艺简单，获得的发酵菌转化率高。 | ||
| 搜索关键词： | 甾醇 发酵菌 胆酸 培养基 纯菌株 发酵 单菌落 菌悬液 改进 接种 倾倒 土壤 滴入 生产 转化 重复 | ||
【主权项】：
1.用于甾醇发酵生产胆酸的发酵菌的定向改进方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将甾醇连续倾倒在同一地点的土壤中，持续时间60d以上；S2、取甾醇倾倒出的土壤；在采取的土壤试样中提取菌悬液；将菌悬液滴入到营养液为甾醇的培养基上培养获得菌落后，挑出单菌落；S3、将单菌落在营养液为甾醇的新的培养基上培养，并且判断出是否为纯菌株；将纯菌株编号保存；S4、将纯菌株分别接种到新的甾醇培养基上；同时判断纯菌株是否具有将甾醇发酵生产胆酸的能力；如果有则将该纯菌株保留，如果没有则去除该纯菌株；S5、将保留的纯菌株接种到新的甾醇培养基上；然后将菌落和培养基底分离，并且在培养基底中提纯胆酸，并且计算胆酸的转化率；S6、继续将分离出来的菌落接种到新的甾醇培养基上，重复步骤S5，直到甾醇转化为胆酸的转化率大于或者等于90％。
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