[发明专利]一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法在审
| 申请号： | 201910408509.2 | 申请日： | 2019-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN110511907A | 公开（公告）日： | 2019-11-29 |
| 发明（设计）人： | 邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞达健康产业有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 34158 合肥方舟知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘跃<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市高新区*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法，具体涉及自体或同种异体外周血单个核细胞在体外稳定的、大量扩增高纯度、高细胞毒活性的NK细胞的方法，步骤为：(1)分离单个核细胞；(2)通过免疫分选去除单个核细胞中的CD3+T淋巴细胞；(3)加入NK细胞培养用无血清细胞培养基及细胞因子IL‑15、IL‑12、IL‑21、IL‑2和OK432，体外培养2‑5天后全换液；(4)NK细胞换液；(5)收获NK细胞。在体外培养条件下稳定扩增大量高纯度、高细胞活性的NK细胞，同时减少T细胞数量，且满足临床应用所需。 | ||
| 搜索关键词： | 单个核细胞 细胞毒活性 换液 增高 外周血单个核细胞 无血清细胞培养基 体外培养条件 临床应用 免疫分选 体外培养 同种异体 细胞活性 细胞因子 高纯度 扩增 体外 种体 自体 去除 收获 | ||
【主权项】：
1.一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法，包括以下步骤：/n(1)分离单个核细胞；/n(2)免疫去除CD3+T淋巴细胞，去除CD3+T淋巴细胞后的单个核细胞的接种浓度为0.1-2×106cells/ml；/n(3)加入无血清培养基、扩增因子；/n(4)培养第2-5天全换液；/n(5)NK细胞收获；/n其特征在于：步骤3中加入的扩增因子为：IL-15、IL-12、IL-21、IL-2和OK432。/n
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