[发明专利]一种用于HBV miR-3荧光定量PCR的检测材料及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于HBV miR‑3的荧光定量PCR检测材料及试剂盒，其中荧光定量PCR检测材料包括6组逆转录引物、qPCR前引物、qPCR后引物和特异性荧光探针。提供的6组荧光定量PCR检测材料具有非常显著的特异性，直接使用SYBR Green染料，其阴性对照也基本不存在非特异干扰；结合TaqMan MGB探针后，阴性对照的非特异干扰完全消除，定量范围上，覆盖7个数量级，从10⁸至10²，决定系数R²为0.997，说明在定量方面覆盖范围广，定量效果好，在样品HBV miR‑3浓度较低时也能准确定量。相比较现有技术而言，本发明的定量效果更好，结果更为可信。

主权项

1.一种用于HBV miR‑3的荧光定量PCR检测材料，包括以下A～F共6组逆转录引物、qPCR前引物和qPCR后引物，A：逆转录引物序列为：CGCGAGCACAGAATTAATACGACTCACTATACGCGAAACGCCGCA(SEQ ID NO.1)；qPCR前引物序列为：TGTGCCCGCTGGATGTGTC(SEQ ID NO.2)；qPCR后引物序列为：CGCGAGCACAGAATTAATACG(SEQ ID NO.3)；B：逆转录引物序列为：CCCATCCCACACACAGCCTGCGAGACTGAGGGATGGGAAACGCCG(SEQ ID NO.5)；qPCR前引物序列为：CCGCTGGATGTGTCTG(SEQ ID NO.6)；qPCR后引物序列为：CTGCGAGACTGAGGGA(SEQ ID NO.7)；C：逆转录引物序列为：CGCCATTACCCAGGCATACGATGACCAGGCGAAACGCCG(SEQ ID NO.9)；qPCR前引物序列为：CGTCGCCGCTGGATGTGTCTG(SEQ ID NO.10)；qPCR后引物序列为：CCATTACCCAGGCATACGATGACCA(SEQ ID NO.11)；D：逆转录引物序列为：CTTCGTAATCGCTGCTATTACCCAGGCATACGATGACCAAGCAGCGATTACGAAGAAACGCCG(SEQ ID NO.13)；qPCR前引物序列为：TCGCCGCTGGATGTGTCTG(SEQ ID NO.14)；qPCR后引物序列为：TATTACCCAGGCATACGATGACCAA(SEQ ID NO.15)；E：逆转录引物序列为：GCGTGGTCCACACCAGTTGACGGGCGACGACCACGCAAACGCCG(SEQ ID NO.17)；qPCR前引物序列为：TCGCCGCTGGATGTGTCTG(SEQ ID NO.18)；qPCR后引物序列为：CCACACCAGTTGACGGGC(SEQ ID NO.19)；F：逆转录引物序列为：CTCAGCGGCTGTCGTGGACTGCGCGCTGCCGCTGAGAAACGCCG(SEQ ID NO.21)；qPCR前引物序列为：TGCCCGCTGGATGTGTCTG(SEQ ID NO.22)；qPCR后引物序列为：GGCTGTCGTGGACTGCG(SEQ ID NO.23)。