[发明专利]一种提高碳纳米管标记的试纸条生物传感器检测灵敏度的方法在审

专利信息
申请号: 201910415524.X 申请日: 2019-05-18
公开(公告)号: CN110231489A 公开(公告)日: 2019-09-13
发明(设计)人: 刘国东;范川;邱万伟;钱立生;李坤 申请(专利权)人: 安徽科技学院
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/558;G01N33/532
代理公司: 合肥广源知识产权代理事务所(普通合伙) 34129 代理人: 徐国法
地址: 233100*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明属于免疫检测传感器的检测技术领域,具体涉及一种提高碳纳米管标记的试纸条生物传感器检测灵敏度的方法,由羧基修饰多壁碳纳米管为原料制备标记抗体复合物,依次调整制备试纸条生物传感器以及检测过程中条件,在兔子IgG在浓度为5ng/ml的条件下,得到各条件的改变对检测线对应相应信号,并进行分析;得到影响碳纳米管标记的试纸条生物传感器检测灵敏度的主要条件包括制备标记抗体复合物时抗体的添加量、检测线上多克隆羊抗兔IgG的浓度、结合垫上标记抗体复合物的量以及检测缓冲液中BSA的浓度。本发明相比现有技术具有以下优点:在最优条件下,检测极限为0.1ng/ml,实现简便、快捷的对蛋白进行超灵敏检测。
搜索关键词: 生物传感器 试纸条 检测灵敏度 标记抗体 碳纳米管 复合物 检测线 制备 检测 多壁碳纳米管 检测技术领域 超灵敏检测 免疫检测 原料制备 最优条件 羧基修饰 抗兔IgG 缓冲液 结合垫 添加量 传感器 抗体 兔子 蛋白 分析
【主权项】:
1.一种提高碳纳米管标记的试纸条生物传感器检测灵敏度的方法,包括利用标记抗体复合物制备试纸条生物传感器,所述试纸条生物传感器包括固定底板,固定底板上粘设硝酸纤维素膜作为底膜,在底膜上从左到右依次粘设样品垫、结合垫和吸收垫,样品垫和结合垫部分重叠,结合垫和吸收垫之间存在间隔形成间隔区,所述间隔区上设有检测线和控制线;所述样品垫在使用前用sample pad缓冲液浸泡30分钟,然后在37℃的干燥箱中干燥4h,然后在干燥器中保存备用;所述结合垫上喷设标记抗体复合物,然后在室温条件下干燥;所述检测线由多克隆羊抗兔IgG喷在硝酸纤维素膜上得到,所述控制线由小鼠抗羊IgG喷在硝酸纤维素膜上得到;试纸条生物传感器的检测方法为,将100μL一定浓度的兔子IgG的检测缓冲液滴加10分钟后,然后用检测缓冲液清洗,在试纸条生物传感器上得到肉眼可观察到的黑色的检测线和控制线,5分钟后,拍照,然后将照片导入电脑,用ImageJ软件对试纸条生物传感器的检测线进行信号转化处理,记录相应的响应信息,从而对数据进行分析处理;其特征在于,由羧基修饰多壁碳纳米管为原料制备标记抗体复合物,所述检测缓冲液由PBST和BSA组成;依次调整制备试纸条生物传感器以及检测过程中各条件,按照上述检测方法在兔子IgG在浓度为5ng/ml的条件下,得到各条件的改变对检测线对应相应信号,并进行分析;得到影响碳纳米管标记的试纸条生物传感器检测灵敏度的主要条件包括制备标记抗体复合物时抗体的添加量、检测线上多克隆羊抗兔IgG的浓度、结合垫上标记抗体复合物的量以及检测缓冲液中BSA的浓度。
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