[发明专利]一种用于检测棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的RPA引物、探针、试剂盒和检测方法有效
| 申请号： | 201910428121.9 | 申请日： | 2019-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN110144421B | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 李常凤;韩文兵;秦文强;闫晓明;周克海;宋云 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院棉花研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 尹明明 |
| 地址： | 230001 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的RPA引物、探针、试剂盒和检测方法，属于生物安全技术领域。所述的RPA引物如下，RPA上游引物序列Vd‑RPA‑F如SEQ ID No.1所示，其下游引物序列Vd‑RPA‑R如SEQ ID No.2所示；所述的RPA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，其序列大小为49bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Sp acer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端33bp处进行THF修饰。本发明还提供基于所述RPA引物和探针形成的试剂盒和检测方法。本发明首次将RPA技术应用到棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为棉花黄萎病的早期诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 棉花 黄萎病 病原 大丽轮枝菌 rpa 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的RPA引物和RPA探针，其特征在于：所述的RPA引物基于棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的ITS区差异序列设计，所述的RPA引物的上游引物Vd‑PRA‑F如SEQ ID No.1所示，所述的RPA引物的下游引物Vd‑PRA‑R如SEQ ID No.2所示；所述的RPA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，所述的RPA探针的序列大小为45bp‑54bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端的30bp‑38bp处进行THF修饰。
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