[发明专利]基于顶空气相色谱测量壳聚糖衍生物氨基含量的方法

摘要

本发明公开了基于顶空气相色谱测量壳聚糖衍生物的氨基含量的方法，所述方法是利用过量茚三酮与含氨基的标准物质反应后，再用碳酸氢钠与剩余的茚三酮反应生成二氧化碳，对照组中未加入标准物质，通过顶空气相色谱测量出二氧化碳的峰面积，二氧化碳相对减少量相对于标准物质的质量呈线性关系，建立标准曲线，然后将标准物质替换为待测氨基含量的壳聚糖衍生物，并检测其二氧化碳的峰面积，根据标准曲线得出此时对应的标准物质的质量，并经计算得出此时的氨基含量。用本发明的方法和传统的电导滴定法对比，相对误差不超过13.03%，而且对于同一样品的检测，相对标准偏差最大为4.83%，所以结果客观准确，且相对于传统测定方法速度更快。

主权项

1.基于顶空气相色谱测量壳聚糖衍生物的氨基含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)标准物质准备：首先将三种以上不同质量的标准物质添加至不同的顶空瓶中，对照组的顶空瓶中不添加标准物质，接着向各顶空瓶中均加入等量的茚三酮水溶液，再向各顶空瓶中置入含有等量碳酸氢钠溶液的玻璃管，盖上顶空盖，水浴加热进行显色反应后，晃动顶空瓶，使玻璃管中的碳酸氢钠和顶空瓶中剩余的茚三酮溶液混合均匀，水浴加热进行中和反应；(2)建立标准曲线：将步骤(1)中经过中和反应后的各顶空瓶置于顶空进样器中，平衡后进行顶空抽提，气相色谱检测得到CO₂峰面积，根据含有标准物质的二氧化碳的峰面积相对于对照组的减少量与相应的标准物质质量之间的对应关系得到标准曲线，y＝ax+b，所述标准曲线的横坐标为标准物质的质量，对应的纵坐标为所减少的二氧化碳的峰面积，a为标准曲线的斜率，b为标准曲线的截距；(3)样品检测：待测氨基含量的壳聚糖衍生物作为待测样品，将步骤(1)中的标准物质替换为待测样品添加至顶空瓶中，对照组不加入待测样品，接着向各顶空瓶中均加入等量的茚三酮水溶液，然后再向顶空瓶中置入含有等量碳酸氢钠溶液的玻璃管，盖上顶空盖，按照步骤(1)中的反应条件进行显色和中和反应；然后将含有待测样品的顶空瓶及对照组的顶空瓶放入顶空进样器中，经过平衡后，通过抽提检测记录二氧化碳的峰面积；(4)结果计算：将步骤(3)中含有待测样品的二氧化碳的峰面积相对于对照组的减少量与步骤(2)所得的标准曲线进行对应，计算得到壳聚糖衍生物的氨基含量。