[发明专利]基于太赫兹波技术的无标记评估水通道蛋白功能的方法有效
| 申请号： | 201910435227.1 | 申请日： | 2019-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN110031423B | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 赵祥;府伟灵;王云霞;张立群;王雪梅;周杰;熊瑜 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院 |
| 主分类号： | G01N21/3586 | 分类号： | G01N21/3586 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于太赫兹波技术的无标记评估水通道蛋白功能的方法，在构建的太赫兹超材料芯片表面接种细胞，培养至细胞贴壁生长并完全融合成单细胞层，然后采用太赫兹时域光谱仪测定等渗缓冲液中细胞层的谐振峰情况；更换低渗缓冲液，大量水分子通过水通道蛋白进入细胞内部，使得初始细胞体积增大，形成溶胀后的细胞，采用太赫兹时域光谱仪实时获取贴壁细胞层在渗透压变化时的谐振峰变化情况，有效反映细胞溶胀程度，即水分子通过细胞层的渗透状况，并根据实时响应曲线求得达到最大响应值所需时间的倒数，实现细胞水通道蛋白功能情况的无标记评估，可用于相关靶向AQP药物的高通量筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 水通道蛋白 无标记 细胞层 细胞 太赫兹时域光谱仪 太赫兹波 水分子 谐振峰 评估 细胞贴壁生长 等渗缓冲液 低渗缓冲液 高通量筛选 接种细胞 实时获取 实时响应 体积增大 贴壁细胞 细胞溶胀 芯片表面 最大响应 超材料 渗透压 靶向 构建 可用 溶胀 倒数 融合 | ||
【主权项】：
1.基于太赫兹波技术的无标记评估水通道蛋白功能的方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）构建太赫兹超材料芯片；（2）在步骤（1）所构建的超材料芯片表面接种细胞，培养至细胞贴壁生长并完全融合成单细胞层，然后采用太赫兹时域光谱仪测定等渗缓冲液中细胞层的谐振峰情况；（3）更换低渗缓冲液，大量水分子通过水通道蛋白进入细胞内部，使得初始细胞体积增大，形成溶胀后的细胞，采用太赫兹时域光谱仪实时获取贴壁细胞层在渗透压变化时的谐振峰变化情况，有效反映细胞溶胀程度，即水分子通过细胞层的渗透状况，并根据实时响应曲线求得达到最大响应值所需时间的倒数，实现细胞水通道蛋白功能情况的无标记评估；步骤（1）的具体方法是：以双面抛光的高阻硅为基底，在其表面依次溅镀上两层金属膜，然后在金属膜上刻蚀出对太赫兹波极化方向不敏感的狭缝结构，使得狭缝的底部为高阻硅。
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