[发明专利]一种LFF2细胞的构建方法在审
| 申请号： | 201910439108.3 | 申请日： | 2019-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN110093317A | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 焦顺昌;张嵘;张天赋;周子珊;宋玉洁;陈小彬;吴子明 | 申请（专利权）人： | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 102200 北京市昌平区双*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种LFF2细胞的构建方法。该方法将细胞用表达抗原表位肽的慢病毒转染抗原呈递细胞后刺激PBMC，之后采用抑制性信号分子的单抗药封闭处理，从而有效的提高T细胞抗肿瘤的能力。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 构建 抗原呈递细胞 生物技术领域 抗原表位肽 封闭处理 信号分子 抗肿瘤 慢病毒 抑制性 单抗 转染 刺激 | ||
【主权项】：
1.一种LFF2细胞的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对外周血进行ctDNA外显子测序，或者以肿瘤组织进行全外显子测序，筛选出突变位点，进行抗原表位预测；所述抗原表位的预测是以突变的氨基酸位点为中心，向两侧延伸8个氨基酸，作为潜在抗原表位，分析潜在抗原表位的IC50，将IC50＜1000nM的潜在抗原表位确定为抗原表位；(2)分析任意抗原表位两两相连后接头处的IC50，IC50≥1000nM时进行多肽连接，并进行基因合成；(3)将步骤(1)合成的基因构建表达抗原表位肽的慢病毒表达质粒，并进行慢病毒包装；(4)使用表达抗原表位肽的慢病毒转染抗原呈递细胞，并与PBMC共孵育得到效应细胞；(5)将T细胞上的免疫抑制性信号分子进行封闭，制备得到LFF2细胞。
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