[发明专利]脂质膜包裹负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰药物复合物制备方法

摘要

本发明涉及脂质膜包裹负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰药物复合物制备方法，可有效解决乳腺癌的治疗用药问题，用无定型介孔磷酸锰纳米粒子物理负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂，得到无定型磷酸锰复合物，然后通过薄膜分散法形成脂质膜包裹其表面，构成脂质膜包裹的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰药物复合物；本发明方法操作方便，稳定可靠，所制得的脂质膜包裹的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物具有生物相容性好、毒副作用小等优点，在肿瘤治疗方面可发挥靶向、激活cGAS‑STING通路达到免疫治疗的作用，是乳腺肿瘤治疗药物上的创新，经济和社会效益巨大。

主权项

1.一种脂质膜包裹负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰药物复合物制备方法，其特征在于，用无定型介孔磷酸锰纳米粒子物理负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂，得到无定型磷酸锰复合物，然后通过薄膜分散法形成脂质膜包裹其表面，构成脂质膜包裹的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰药物复合物；具体步骤如下：（1）备无定型磷酸锰纳米粒：首先将2～6mL油酸、3～9mL油胺和12～36mL甲苯加入25mL～100mL聚四氟乙烯内芯中，再在磁力搅拌下加入0.2～0.6mL去离子水、253.16～759.48mg乙酰丙酮锰、0.4～1.2mL磷酸三乙酯，置于反应釜，密封后放入马弗炉，180℃反应9h，将反应釜取出，冰水混合物下使其快速降至室温，取出反应釜内芯中反应溶液，加入40mL无水乙醇，析出沉淀物，12000rpm离心10min，将所得的沉淀物用正已烷洗涤两次，12000rpm离心10min，沉淀物干燥即为无定型磷酸锰纳米粒；（2）制备负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物：将步骤（1）制备无定型介孔PMP 5～10mg分散于5～10mL、pH7.4的PBS缓冲液中，成第一混合液，将10～20mg DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂分散在1～2mL去离子水中，成为第二混合液：将第二混合液在搅拌下滴加于第一混合液中，室温搅拌24h，12000～15000rpm离心5～10min，真空干燥即得负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物；所述的DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂为依托泊苷、替尼泊苷、多柔比星、伊达比星或米托蒽醌中的一种；（3）制备脂质膜包裹的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物：通过薄膜分散法形成磷脂薄膜，将磷脂、胆固醇、DSPE‑PEG2000的混合物42.825mg分散在15～20mL的氯仿置于茄形瓶中，磷脂︰胆固醇︰DSPE‑PEG2000的重量比为14︰2︰1，在超声下充分溶解，使用旋转蒸发仪，在40℃～45℃下旋转蒸发15～30min，形成均匀干燥的磷脂薄膜，将步骤（2）制备的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物分散在pH7.4的PBS缓冲溶液5～8mL中，使用旋转蒸发仪，在40℃～45℃下孵育30min～60min进行水合，即成脂质膜包裹的负载DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂的无定型介孔磷酸锰复合物。