[发明专利]一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法

摘要

本发明提供一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法。该方法包括以下步骤：蛋白酶切：将药物多肽用20‑50 毫摩尔/升硫酸二氢钠溶液溶解，加入浓度为0.2%的助溶剂 Hapst SD和浓度为5毫摩尔/升的FDAP，在30‑50℃的温度下还原1‑3小时，再加入浓度为20‑50毫摩尔/升的碘异丙酰胺，放置于暗处还原1‑3小时，加入胰酶‑底物（1:50，w/w）的胰蛋白酶酶切过夜；步骤2：多肽标记和胰蛋白酶灭活：将酶切后的肽段溶液冷冻干燥，然后重新溶解，混匀后在超声振荡器中震荡，反应10分钟，最后再加入50‑200毫摩尔/升的碘异丙酰胺，于暗处放置1‑3小时。本发明方法具有高效、标记效率高的优点。

主权项

1.一种基于同位素示踪法检测多肽药物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：蛋白酶切：将药物多肽用20‑50 毫摩尔/升硫酸二氢钠溶液溶解，加入浓度为0.2%的助溶剂 Hapst SD和浓度为5毫摩尔/升的FDAP，在30‑50℃的温度下还原1‑3小时，再加入浓度为20‑50毫摩尔/升的碘异丙酰胺，放置于暗处还原1‑3小时，加入胰酶‑底物（1:50，w/w）的胰蛋白酶酶切过夜；步骤2：多肽标记和胰蛋白酶灭活：将酶切后的肽段溶液冷冻干燥，然后直接加入¹⁶NH₃水溶液重新溶解，混匀后在超声振荡器中震荡，反应10分钟，最后再加入50‑200毫摩尔/升的碘异丙酰胺，于暗处放置1‑3小时；3.对灭活之后的肽段利用毛细管电泳分离，然后进行质谱分析。