[发明专利]一种适合工业化生产的高纯度A40926B0制备方法

摘要

本发明属于生物药物分离纯化技术领域，具体涉及糖肽类抗生素达巴万星前体A40926的高纯度产品的制备方法，公开了一种适合工业化生产的高纯度A40926B0制备方法。首先对A40926发酵液进行预处理，然后采用膜过滤进行微滤、超滤和纳滤，对A40926发酵液进行初步分离纯化和浓缩；再进行酸沉淀，最后用制备液相色谱制备进行纯化，并经过减压浓缩和冻干获得纯度大于99%的高纯度A40926B0。

主权项

1.一种适合工业化生产的高纯度A40926B0的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）将符合发酵工艺参数的A40926B0发酵液终止发酵后转入预处理罐中，加入高分子脱色絮凝剂搅拌均匀后静置，得到沉淀的剩余菌体和上清液，将上清液转移至膜过滤系统储罐中，剩余菌体用氢氧化钠溶液调节pH值至10‑11，然后加入剩余菌体体积2‑5倍的50‑75%低碳醇溶液，搅拌处理30‑90分钟，得到低碳醇浸泡液；（2）将（1）中的低碳醇浸泡液过滤、去除菌丝体，将除菌后的低碳醇浸泡液与膜过滤系统储罐中的上清液混合，得到混合液，将混合液进行超滤去杂得到超滤混合液；再将超滤混合液进行纳滤除杂，得到纳滤混合液；（3）将（2）中获得的纳滤混合液用盐酸调节pH值至酸性，静置60‑120分钟，减压过滤并收集滤饼，将滤饼溶于碳酸钠‑碳酸氢钠缓冲溶液中，制成A40926上样液；所述碳酸钠‑碳酸氢钠缓冲溶液的pH值为10‑11并含有5‑15%的乙醇；（4）将（3）中的A40926上样液上柱高压制备液相色谱，色谱柱采用HILIC亲水色谱柱进行分离纯化，收集纯度大于98%的制备色谱流出液；（5）收集（4）获得的制备色谱流出液经过减压浓缩并冻干获得高纯度A40926 B0。