[发明专利]一种测定中成药中巴马汀和小檗碱的方法

摘要

本发明公开了一种测定中成药中巴马汀和小檗碱的方法，涉及药物分析领域。本发明所利用的原理即：中成药中活性成分小檗碱和巴马汀异喹啉生物碱本身无荧光，葫芦脲[7]（CB[7]）本身也无荧光，但CB[7]能与小檗碱和巴马汀形成稳定的包合物，且可以使无荧光的小檗碱和巴马汀的荧光显著增敏，溶液的荧光显著增强。借助毛细管电泳的良好分离能力，小檗碱和巴马汀与CB[7]形成的包合物还能实现良好的分离，而且不被其它物质干扰，选择性好，而且灵敏度也比紫外检测高两个数量级。该毛细管电泳/荧光分析测定方法灵敏度高、选择性好、抗干扰能力强；比现有的毛细管电泳/紫外分析测定法高两个数量级，而且该方法也可以用于生物样品中小檗碱和巴马汀的分析测定。

主权项

1.一种测定中成药中巴马汀和小檗碱的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）检测准备：缓冲溶液为PH=7的60 mmol·L^‒1Na₂HPO₄和35%的甲醇水溶液；激光诱导荧光检测器：激发波长λ_ex =300~500 nm，发射波长λ_em=450~600nm；准备色谱条件：实验所用毛细管柱；检测分离电压为24 kv，进样压力为0.5 psi，进样量为3~5s，温度为25℃；（2）储备液的配制：称取一定量的小檗碱、巴马汀标准品和葫芦脲[7]，用步骤（1）中的缓冲溶液配制成一定浓度的小檗碱标准储备液和巴马汀标准储备液；并在两种储备液中加入葫芦脲[7]，葫芦脲[7]的物质的量是小檗碱和巴马汀物质的量的3倍以上；（3）供试品溶液的配制：称取一定量的待测样品，并用一定量的甲醇超声萃取20min，静置10~15min，重复三次，合并三次萃取液；取一定量萃取液，估计该萃取液中小檗碱和巴马汀的含量；称取一定量的葫芦脲[7]粉末，葫芦脲[7]粉末是萃取液中小檗碱和巴马汀含量估计值的3倍以上，加入萃取液中；然后用步骤（1）中的缓冲溶液定容；（4）将小檗碱和巴马汀标准储备液进行毛细管电泳/荧光检测，对其进行定性和定量测定；然后将供试品溶液的进行毛细管电泳/荧光检测，对其进行定性定量测定。