[发明专利]一种RNA依赖的RNA聚合酶制备方法与应用在审
| 申请号： | 201910457310.9 | 申请日： | 2019-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN110079511A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 李正和;许凯;裘炀琳 | 申请（专利权）人： | 李正和;许凯 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人： | 胡剑辉 |
| 地址： | 310000 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开一种RNA依赖的RNA聚合酶制备方法与应用，该制备方法以香石竹斑驳病毒属病毒作为原料，利用含聚合酶结构域且无N‑末端的跨膜区或跨膜区突变的病毒复制蛋白为基础制备重组蛋白，获得具有RNA依赖的RNA聚合酶，具体为首先选取番茄丛矮病毒科的香石竹斑驳病毒属病毒作为原料；然后利用截短或突变除去病毒RNA的N‑末端的跨膜区，得到模板RNA；最后通过原核表达或真核表达在细胞内或细胞外进行RNA聚合酶的合成；采用本发明的方法获得重组蛋白，其RNA产量大于1毫克/毫升，适合工业化RNA的合成与生产。 | ||
| 搜索关键词： | 跨膜区 制备 病毒属病毒 突变 番茄丛矮病毒科 合成 聚合酶结构域 制备重组蛋白 细胞 病毒复制 原核表达 真核表达 重组蛋白 病毒RNA 模板RNA 截短 应用 蛋白 生产 | ||
【主权项】：
1.一种RNA依赖的RNA聚合酶制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a、选取番茄丛矮病毒科的香石竹斑驳病毒属病毒作为原料；b、利用截短或突变除去病毒RNA的N‑末端的跨膜区，得到模板RNA；c、通过原核表达或真核表达在细胞内或细胞外进行RNA聚合酶的合成。
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