[发明专利]一种活体微生物固定化微球及其制备方法和应用

摘要

本发明公开一种活体微生物固定化微球及其制备方法和应用。该方法包括微生物固定化载体、菌液悬浮定殖、微生物活性颗粒和增殖再培养等步骤。本发明的微球呈球状，内部有孔隙，直径3.0～4.0mm，比重1.10～1.20g/cm³，弱碱性，具备良好的沉降性能和机械强度。该微球不但能发挥载体对镉的化学吸附作用，还能改善活性微生物的生长繁殖环境，从而提高活性细菌对镉的胞外吸附和胞内积累作用。在初始Cd²⁺浓度250mg/L以下范围内，最大吸附‑积累量可达158.77mg/g。本发明具备原材料廉价易得、工艺可操作性强、微球产品环保且易回收、治理效果显著等优点，在重金属污染水体的生物治理过程中有广阔的应用前景。

主权项

1.一种活体微生物固定化微球的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)微生物固定化载体：水稻秸秆经过干燥、粉碎和过筛后，限氧热解、冷却并研磨过筛，得到微生物固定化载体；(2)菌液悬浮定殖：将蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)RC‑1活化，获得细胞悬液；取5～20mL细菌悬液和0.2～1.5g微生物固定化载体混合，振荡培养1～2h，制成混合浆液A；(3)微生物活性颗粒：将灭菌的质量分数2％～6％的海藻酸钠溶液添加至混合浆液A中，获得混合浆液B；然后将混合浆液B滴入到灭菌的CaCl₂溶液中，固化2～10h，形成微生物活性颗粒；其中，微生物固定化载体在混合浆液B中的用量为0.2～1.5g/100mL；(4)增殖再培养：将步骤(3)得到的微生物活性颗粒于新鲜牛肉膏蛋白胨液体培养基增殖再培养1～4h，用无菌水浸泡处理表面后，得到活体微生物固定化微球；所述的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)RC‑1，于2017年03月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC NO：13930。