[发明专利]高效制备口蹄疫病毒样颗粒的重组DNA载体、应用和疫苗有效
| 申请号： | 201910476738.8 | 申请日： | 2019-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN110129348B | 公开（公告）日： | 2022-09-27 |
| 发明（设计）人： | 许雁;诺曼.吉利卡;李改;夏燕 | 申请（专利权）人： | 诺华生物科技（武汉）有限责任公司;许雁 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/42;C07K14/09;A61K39/135;A61P31/14;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 刘桐亚 |
| 地址： | 430073 湖北省武汉市*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于高效制备口蹄疫病毒样颗粒的重组DNA载体，以及利用包含该重组DNA载体的重组表达质粒载体转染宿主细胞制备的口蹄疫病毒样颗粒、其应用及疫苗。针对3C蛋白酶对宿主细胞的毒性及影响口蹄疫VLP的产量问题，本发明设计了针对3C蛋白酶基因表达起干扰作用的3CshRNA片段，明显减少了口蹄疫VLP制备过程中3C蛋白酶的表达量，同时在原始口蹄疫病毒3C蛋白酶基因的基础上进行三个位点的突变，特异性调节了3C蛋白酶的作用效果。通过对3C蛋白酶基因的改造，降低了3C蛋白酶对宿主细胞的毒性并提高了3C蛋白酶对口蹄疫病毒P1前体蛋白的有效切割性能，从而显著提高了口蹄疫病毒样颗粒的合成产量，为大规模生产和使用口蹄疫病毒样颗粒疫苗奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 高效 制备 口蹄疫病毒 颗粒 重组 dna 载体 应用 疫苗 | ||
【主权项】：
1.一种制备口蹄疫病毒样颗粒的重组DNA载体，其特征在于，所述重组DNA载体包含以下3个转录盒：(1)带有口蹄疫病毒P1前体蛋白DNA的基因转录盒；(2)带有突变修饰后的口蹄疫病毒3C蛋白酶DNA的基因转录盒；(3)可降低3C蛋白酶基因表达的短发夹shRNA转录盒。
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