[发明专利]一种人乳头瘤病毒18型L1蛋白的突变体

摘要

本发明涉及一种突变的HPV18L1蛋白(或其变体)，其编码序列和制备方法，以及包含其的病毒样颗粒，所述蛋白(或其变体)和病毒样颗粒能够诱发抗至少两个型别的HPV(例如，HPV18和HPV45，或者HPV18、HPV45和HPV59)的中和抗体，从而可用于预防所述至少两个型别的HPV感染以及由所述感染所导致的疾病例如宫颈癌和尖锐湿疣。本发明还涉及上述蛋白和病毒样颗粒用于制备药物组合物或疫苗的用途，所述药物组合物或疫苗可用于预防所述至少两个型别的HPV感染以及由所述感染所导致的疾病例如宫颈癌和尖锐湿疣。

主权项

1.一种突变的HPV18 L1蛋白或其变体，其中，所述突变的HPV18 L1蛋白与野生型HPV18L1蛋白相比，具有下述突变：/n(1)N端截短了40-80个氨基酸，例如40-50个、45-70个、50-70个、55-65个、60-70个、65-75个、60-80个或70-80个氨基酸；和/n(2)(a)位于野生型HPV18 L1蛋白第235-243位的氨基酸残基被替换为第二型别的野生型HPV的L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；或/n(b)位于野生型HPV18 L1蛋白第327-346位的氨基酸残基被替换为第二型别的野生型HPV的L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；或/n(c)位于野生型HPV18 L1蛋白第114-123位的氨基酸残基被替换为第二型别的野生型HPV的L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；或/n(d)位于野生型HPV18 L1蛋白第176-202位的氨基酸残基被替换为第二型别的野生型HPV的L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；/n并且，所述变体与所述突变的HPV18 L1蛋白相异仅在于一个或几个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个或9个)氨基酸的置换(优选保守置换)、添加或缺失，且保留了所述突变的HPV18 L1蛋白的功能，即，能够诱导针对至少两个型别的HPV(例如，HPV18和HPV45，或者HPV18、HPV45和HPV59)的中和抗体；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白具有(2)(a)或(2)(b)中所定义的突变，并且任选地，还具有下述突变：/n(3)位于野生型HPV18 L1蛋白第112-123位的氨基酸残基被替换为第三型别的野生型HPV L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白具有(2)(c)或(2)(d)中所定义的突变，并且任选地，还具有下述突变：/n(4)位于野生型HPV18 L1蛋白第410-421位的氨基酸残基被替换为第三型别的野生型HPV L1蛋白的相应位置的氨基酸残基；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白具有(2)(c)和(2)(a)所定义的突变，并且任选地，还具有(4)所定义的突变；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白与野生型HPV18 L1蛋白相比，N端截短了45、50、52、55、58、60、62、65、68、70、72、75或78个氨基酸；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白与野生型HPV18 L1蛋白相比，N端截短了65个氨基酸；/n优选地，所述第二型别的野生型HPV为HPV45；优选地，(2)(a)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV45 L1蛋白第201-209位的氨基酸残基；优选地，(2)(b)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV45 L1蛋白第293-314位的氨基酸残基；优选地，(2)(c)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV45 L1蛋白第79-89位的氨基酸残基；优选地，(2)(d)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV45 L1蛋白第142-168位的氨基酸残基；/n优选地，所述第三型别的野生型HPV为HPV59；优选地，(3)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV59 L1蛋白第51-62位的氨基酸残基；优选地，(4)中所述的相应位置的氨基酸残基为野生型HPV59 L1蛋白第349-360位的氨基酸残基；/n优选地，所述野生型HPV18 L1蛋白具有如SEQ ID NO:1或113所示的氨基酸序列；/n优选地，所述野生型HPV45 L1蛋白具有如SEQ ID NO:2或115所示的氨基酸序列；/n优选地，所述野生型HPV59 L1蛋白具有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；/n优选地，所述突变的HPV18 L1蛋白具有选自下列的氨基酸序列：SEQ ID NO:6、7、9、13、17、18或19。/n