[发明专利]一种基于dsDNA-SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法在审
申请号: | 201910484799.9 | 申请日: | 2019-06-05 |
公开(公告)号: | CN110241180A | 公开(公告)日: | 2019-09-17 |
发明(设计)人: | 张信凤;范晓娅;邓莉;李琳 | 申请(专利权)人: | 成都理工大学 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610059 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 一种基于dsDNA‑SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法,主要将dsDNA‑SYBR Green I光敏产生的短寿命、强氧化能力的单线态氧的氧化能力用K4Fe(CN)6进行储存,将其氧化成K3[Fe(CN)6]。通过该简单的储存步骤,可使光敏氧化鲁米诺化学发光的强度提高约30倍,从而显著地提高检测DNA的灵敏度,对BRCA1、BRCA2、p53基因的检出限分别可达3 pM、6pM和5pM。而且,该法操作简便,无需分离、标记等步骤,并可拓展至其它任意序列DNA的检测,具有良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 光敏 化学发光 传感 催化 储存 氧化鲁米诺 单线态氧 氧化能力 检出限 灵敏度 强氧化 检测 拓展 应用 | ||
【主权项】:
1.一种基于dsDNA‑SYBR Green I光敏催化的化学发光传感方法,其特征在于包括以下三个步骤:(1)将目标基因和相应的互补链(即识别探针)在室温下孵育一段时间形成双链DNA,继而与SYBR Green I (SG) 孵育形成dsDNA‑SG复合物,(2)在上述的溶液中加入一定量的K4[Fe(CN)6],在蓝色LED灯照射下,染料SG的光敏作用产生1O2,1O2具有较高的反应活性,可将K4[Fe(CN)6]氧化为K3[Fe(CN)6],(3)取光照后的溶液,加入碱性鲁米诺溶液,K3[Fe(CN)6]氧化鲁米诺产生化学发光,并根据化学发光的信号对目标DNA进行定量分析。
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