[发明专利]一种基于上转换-金纳米-磁性纳米特异性体系的茶叶中铅含量检测方法

摘要

本发明涉及一种基于上转换‑金纳米‑磁性纳米特异性体系的茶叶中铅含量检测方法，属于食品安全检测技术领域；首先制备得到上转换纳米材料；加入乙醇、氨水、正硅酸四乙酯、3‑氨丙基三乙氧基硅烷，得到氨基功能化上转换纳米材料，再制备适配体功能化上转换纳米材料；通过适配体互补链连接金纳米材料和磁性纳米材料，得到金纳米‑磁性纳米材料溶液，与适配体功能化上转换纳米材料溶液混合，得到特异性检测体系，加入铅离子溶液后测定荧光强度信号特征值，作为纵坐标，以铅离子浓度为横坐标建立铅含量检测标准曲线，实现待测茶叶中铅含量的测定；本发明通过构建稳态特异性铅离子荧光检测体系，实现茶叶中铅的高灵敏、特异性检测，具有较宽的线性检测范围和较低的检测限，应用前景好。

主权项

1.一种基于上转换‑金纳米‑磁性纳米特异性体系的茶叶中铅含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，制备得到上转换纳米材料；步骤二，将步骤一得到的上转换纳米材料加入到乙醇中，超声分散，加入去离子水与氨水，进行第一次搅拌反应；加入正硅酸四乙脂，进行第二次搅拌反应；加入3‑氨丙基三乙氧基硅烷，进行第三次搅拌反应，冷却至室温，得到反应产物；用乙醇和去离子水的混合液对反应产物清洗，真空干燥，得到氨基功能化上转换纳米材料；步骤三，取步骤二得到的氨基功能化上转换纳米材料，超声分散于磷酸缓冲盐溶液A中；加入戊二醛溶液，在室温下第一次反应后，用磷酸缓冲盐溶液清洗，再分散于磷酸缓冲盐溶液B中；加入适配体溶液，在室温下第二次反应后，用磷酸缓冲盐溶液清洗，再分散于磷酸缓冲盐溶液C中，得到适配体功能化上转换纳米材料溶液；步骤四，将四氯金酸溶液和去离子水混合，在一定温度条件下进行第一次反应；然后加入柠檬酸三钠溶液，进行第二次反应，冷却至室温，得到金纳米溶液；步骤五，将六水三氯化铁、1,6‑已二胺、无水醋酸钠、乙二醇混合，得到混合溶液；在一定温度条件下进行水浴反应，待混合溶液清澈透明，转移到聚四氟乙烯内衬中，然后放置反应釜中并在烘箱中反应，冷却至室温，利用磁铁分离磁性纳米材料，用去离子水清洗，真空干燥后得到磁性纳米材料；步骤六，将步骤五得到的磁性纳米材料超声分散在磷酸缓冲盐溶液D中，加入戊二醛溶液进行反应，反应后用磷酸缓冲盐溶液进行第一次清洗，加入亲和素溶液进行反应，反应后用磷酸缓冲盐溶液进行第二次清洗，真空干燥后得到亲和素修饰的磁性纳米材料；步骤七，将步骤六得到的亲和素修饰的磁性纳米材料分散到磷酸缓冲盐溶液E中，与生物素修饰的适配体互补链溶液进行第一次反应，然后加入步骤四得到的金纳米溶液进行第二次反应，通过磁铁分离得到金纳米‑磁性纳米材料，再次分散到磷酸缓冲盐溶液F中，得到金纳米‑磁性纳米材料溶液；步骤八，将步骤三得到的适配体功能化上转换纳米材料溶液和步骤七得到的金纳米‑磁性纳米材料溶液分别用磷酸缓冲盐溶液稀释，得到稀释液后，再混合孵育，得到上转换‑金纳米‑磁性纳米材料，采用磁体分离，并重新分散到磷酸缓冲盐溶液中，得到特异性检测体系；步骤九，分别将不同浓度的铅离子溶液加入到步骤八得到的特异性检测体系中反应，得到检测溶液，测定检测溶液的荧光强度信号特征值，以铅离子浓度为横坐标，荧光强度信号特征值为纵坐标，建立铅含量检测标准曲线；步骤十，将茶叶样本粉粹过筛，得到茶粉；然后将茶粉和浓硝酸混合进行微波消解，室温冷却；得到消解液，采用油浴使消解液中酸完全挥发，过滤，调节消解液的pH，加入到步骤八得到的特异性检测体系中，得到检测溶液，测定检测溶液的荧光强度信号特征值，通过步骤九所构建的铅含量检测标准曲线，计算出茶叶样本中铅含量。