[发明专利]一种人血浆中卡托普利的LC-MS/MS检测方法

摘要

本发明涉及一种人血浆中卡托普利的LC‑MS/MS检测方法，取在全血样品中预先加入维生素C溶液，维生素C溶液为1.5mol·L^‑1水溶液，离心获得血浆样品，取500μL血浆混入100μL对溴苯甲酰甲基溴溶液，对溴苯甲酰甲基溴溶液为2mg/mL乙腈溶液，反应10min后血浆置于‑80℃冰箱保存待测，取50μL待测血浆样品，混入内标溶液，内标溶液为乙腈配制成的同位素标记物卡托普利‑d₃浓度为200ng/mL的溶液，再加入乙腈后涡流振荡10min后离心，取上清液进行LC‑MS/MS分析。本发明解决了卡托普利在生物样品分析过程中不稳定的问题，提高了分析方法的准确性和可靠性，与现有技术相比具有准确度高、样品消耗量少、灵敏度高、检测通量高的特点。

主权项

1.一种人血浆中卡托普利的LC‑MS/MS检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：样品前处理，采集血样约3mL于含50μL维生素C溶液的抗凝管中，离心获得血浆样品，取500μL血浆样品，混入100μL对溴苯甲酰甲基溴溶液，反应10min后血浆置于‑80℃冰箱保存待测；取50μL待测血浆样品，混入内标溶液，内标溶液为乙腈配制成的同位素标记物卡托普利‑d3浓度为200ng/mL的溶液，再加入乙腈后涡流振荡10min后离心，取上清液进行LC‑MS/MS分析；所述内标溶液为乙腈配制成的同位素标记物卡托普利‑d3浓度为200ng/mL的溶液；S2：采用LC‑MS/MS法测定待测样品中卡托普利的浓度；I.色谱条件：色谱柱：100×4.6mm，3.5μm；柱温：40℃；进样体积：2μL；流动相A：含有0.2％甲酸的2mM醋酸铵水溶液；流动相B：乙腈，采用体积比为35：65的A：B相等梯度洗脱，自动进样器温度为4℃，流动相的流速为1.1mL/min，其中柱后分流0.4mL/min进入质谱；II.质谱条件：离子源：电喷雾电离源ESI；喷雾电压5500V；离子源温度：600℃；CUR：40psi；扫描模式：正离子多反应监测+MRM，卡托普利和卡托普利‑d3离子反应分别为m/z 414.4→216.2和m/z 417.1→219.2，碰撞能量CE分别为23和25eV；S3：标准曲线样品的配制，称取卡片托普利以甲醇溶解并定容，配制成浓度约为1.00mg/mL的贮备液，以乙腈：水逐级稀释得到标准系列工作溶液，以人空白血浆稀释该工作溶液，制成标准曲线样品，完成后立即向标准曲线样品中加入维生素C和对溴苯甲酰甲基溴溶液，反应10min后，以上述步骤S1的处理方法和LC‑MS/MS条件检测，并根据检测结果绘制相应的卡托普利的标准曲线。