[发明专利]通用型病原微生物快速磁分离方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201910514060.8 | 申请日： | 2019-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN110308277A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 农高惠;何林声 | 申请（专利权）人： | 珠海市德灏生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/531;G01N33/543 |
| 代理公司： | 重庆双马智翔专利代理事务所(普通合伙) 50241 | 代理人： | 顾晓玲 |
| 地址： | 519060 广东省珠海市南屏科*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通用型病原微生物快速磁分离方法：(1)制备通用桥连磁珠：a)制备磁珠‑链霉亲和素交联物；b)制备生物素‑Ab2交联物；c)制成通用桥连磁珠：将磁珠‑链霉亲和素交联物与生物素‑Ab2交联物混合孵育，制得通用桥连磁珠；(2)制备特异捕捉磁珠：将通用桥连磁珠与待测病原微生物的鼠源性Ab1混合，即可获得特异捕捉磁珠；(3)采用特异捕捉磁珠对待检测样品进行病原体捕捉分离纯化、初步鉴别。还公开了一种试剂盒，包括前述方法制备得到的特异捕捉磁珠。本发明实现了免疫磁珠制备的简易化、性能最优化、易实现自动化，通过分离操作即可获得单一目的菌，能够对样本中多种病原同步、自动化检测。 | ||
| 搜索关键词： | 磁珠 制备 交联物 病原微生物 桥连 捕捉 通用 链霉亲和素 磁分离 通用型 自动化 病原 分离操作 分离纯化 混合孵育 检测样品 免疫磁珠 制备生物 种试剂盒 病原体 生物素 试剂盒 鼠源性 最优化 鉴别 样本 简易 检测 | ||
【主权项】：
1.一种通用型病原微生物快速磁分离方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)制备通用桥连磁珠：a)制备磁珠‑链霉亲和素交联物：取粒径为10～50nm的羧基磁珠,活化后与链霉亲和素结合，并封闭残余活性基团；b)制备生物素‑Ab2交联物：取生物素进行活化，再与Ab2偶联；或者，用商品化的水溶性生物素N‑羟基琥珀酰亚胺酯与Ab2直接偶联；c)制成通用桥连磁珠：将磁珠‑链霉亲和素交联物与生物素‑Ab2交联物混合孵育，制得通用桥连磁珠，洗涤去除游离的Ab2；(2)制备特异捕捉磁珠：将前面制备得到的通用桥连磁珠与待测病原微生物的鼠源性Ab1混合，即可获得特异捕捉磁珠，洗涤去除游离Ab1；(3)采用特异捕捉磁珠对待检测样品进行病原体捕捉分离纯化、初步鉴别。
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