[发明专利]副猪嗜血杆菌的血清分型方法、引物组合以及PCR体系在审

专利信息
申请号: 201910520600.3 申请日: 2019-06-17
公开(公告)号: CN110205395A 公开(公告)日: 2019-09-06
发明(设计)人: 徐高原;王召贺;汤细彪;周明光;郝根喜;张华伟 申请(专利权)人: 武汉科前生物股份有限公司
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 商秀玲
地址: 430000 湖北省武*** 国省代码: 湖北;42
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明提供了副猪嗜血杆菌的血清分型方法、引物组合以及PCR体系,本发明为15种血清型的副猪嗜血杆菌分别设计特异性引物,序列为:SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.30,并将15对特异性引物分成六组,每组包括1至3对引物,每个PCR体系包括一组引物,整体构成一个多重PCR体系;后以待测血清型的副猪嗜血杆菌菌株基因组DNA为模板,分别使用上述六组引物进行PCR检测,结果和参考菌株条带进行比对。本发明通过将引物进行分组后进行多重PCR,使用6个PCR体系,比一般的PCR方法的15个体系大幅简化,节约鉴定血清型的成本,同时不同血清型的特异性条带区别明显,使得本发明可以准确鉴定出副猪嗜血杆菌的15种血清型。
搜索关键词: 副猪嗜血杆菌 血清型 引物 特异性引物 血清分型 引物组合 多重PCR 菌株基因组DNA 特异性条带 参考菌株 对引物 比对 条带 分组 节约
【主权项】:
1.副猪嗜血杆菌的血清分型方法,其特征在于,包括:为15种血清型的副猪嗜血杆菌HPS每种设计一对特异性引物,序列为:SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.30,将上述15对特异性引物进行分组:G1组包含SEQ ID NO.1‑2、SEQ ID NO.11‑12和SEQ ID NO.27‑28所示序列的特异性引物;G2组包含SEQ ID NO.3‑4、SEQ ID NO.15‑16和SEQ ID NO.17‑18所示序列的特异性引物;G3组包含SEQ ID NO.5‑6、SEQ ID NO.13‑14和SEQ ID NO.25‑26所示序列的特异性引物;G4组包含SEQ ID NO.7‑8、SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.19‑20所示序列的特异性引物;G5组包含SEQ ID NO.21‑22和SEQ ID NO.29‑30所示序列的特异性引物;G6组包含SEQ ID NO.23‑24所示序列的特异性引物;以待测血清型的副猪嗜血杆菌菌株基因组DNA为模板,分别使用上述六组引物进行PCR检测,结果和参考菌株条带进行比对。
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