[发明专利]一种富血小板血浆的经济制备方法

摘要

本发明公开了一种富血小板血浆的经济制备方法，其中，具体步骤如下：采用10ML的导管封管器；输入9ML患者静脉血；放入转速为2100rpm的离心机中离心，使血液分成三层；之后微量推注泵启动；利用微量推注泵均匀缓慢推压导管封管器；导管封管器放入转速为2100rpm的离心机中离心，血液仍分成三层；利用微量推注泵推血浆层约为2ML转移到L形式布局连接的一次性5ML无菌注射器内；取血液标本到营养琼脂平板培养基血培养皿上进行细菌培养；关闭微量推注泵；如此完成提取PRP工作。本发明具有操作流程简单规范化可复制化，整个过程均在一个导管封管器中完成，避免操作过程细菌传染、微量推注泵控制代替手工操作提取PRP精准稳定，及避免血小板破坏或者被激活和成本低的效果。

主权项

1.一种富血小板血浆的经济制备方法，其中，具体步骤如下：(1)采用10ML且内部预封装有抗凝剂的导管封管器，之后将抗凝剂挤压出剩下1ML；(2)按照9:1的比例，往导管封管器内输入9ML患者静脉血；(3)将静脉血与抗凝剂混匀后取0.1Ml血液标本进行血小板数量检测，之后将导管封管器垂直放入转速为2100rpm的离心机中，离心时间10min，使血液分成三层从上到下依次为血浆层、血小板血浆层和红细胞层；(4)之后戴上无菌手套对预先消毒30分钟的工作台上直立固定安放的微量推注泵进行启动，把装有分层血液的导管封管器垂直装于微量推注泵并识别确认，在导管封管器对应微量推注泵下方再放置废液杯；(5)利用微量推注泵均匀缓慢推压导管封管器，使血液中最底层3.5～4Ml的红细胞层从导管封管器排出到废液杯内，直到下层红细胞层仅余0.5Ml时停止推泵；此时导管封管器内的血液仍为三层从上到下依次为血浆层、血小板血浆层和仅少量的红细胞层；(6)为进一步从上述(5)中分离出富血小板层，将剩余的三层血液的导管封管器垂直放入设定转速为2100rpm的离心机中，再次离心时间10min，血液仍分成三层从上到下依次为血浆层、富血小板血浆层和少量的红细胞层；(7)从离心机取出导管封管器，及另一个一次性5Ml无菌注射器以L形式布局分别与三通阀连接，此时上述的导管封管器和无菌注射器两个管器可通过三通阀来控制关闭和相通；将调节三通阀L方向关闭并保持1字形方向垂直开通，后安装于微量推注泵，此时的导管封管器和无菌注射器两个管器不相通，利用预先直立固定的微量推注泵均匀缓慢推压已识别确认的导管封管器，使血液中的最底层0.5Ml红细胞层通过1字形方向开通的三通阀通道从导管封管器排出0.3Ml落到废液杯内，直到保留0.2Ml左右的红细胞层；此时，将调节三通阀旋转L方向打开并关闭1字形方向，此时的导管封管器和无菌注射器两个管器相通，再利用微量推注泵均匀缓慢推压导管封管器内下段的富血小板血浆层为2ML转移到L形式布局连接的一次性5Ml无菌注射器内；(8)将上述(7)中载有2Ml的PRP无菌注射器取出充分混匀后，取0.1Ml血液标本进行血小板数量检测和取0.1Ml血液标本放置接种到营养琼脂平板培养基血培养皿上，将其放入35±2℃培养箱进行细菌培养，分别在3，5天进行观察，确保提取过程中没有受到杂菌的污染，保证了临床应用的安全性，做到事后监管；(9)关闭微量推注泵，将剩余4Ml左右贫血小板血浆层的导管封管器及其连接的三通阀从微量推注泵的卡槽上取出弃用；分离前后全自动血液分析仪进行血小板数量检测对比，达原计数的2.5～3.5倍符合临床需求；如此完成提取PRP工作。