[发明专利]一种基于铁蛋白三维结构免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种基于铁蛋白三维结构免疫传感器的制备方法及应用，属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域；本发明利用电致化学发光ECL技术，以铁蛋白作为基底，在其外部共价交联ECL发光分子N‑(4‑氨丁基)‑N‑乙基异鲁米诺分子得到异鲁米诺‑铁蛋白，通过调控反应条件，在异鲁米诺‑铁蛋白表面原位还原纳米金，得到一种新颖的三维杂化纳米结构异鲁米诺‑铁蛋白‑纳米金，并基于该结构提出了一种免疫传感器的制备方法，该方法具有制备简单、成本低、反应能耗低、绿色环保的优点，将传感器用于降钙素原的检测，具有灵敏度高、特异性强、重现性好的优点，其检出限为3.4 fg/mL，线性范围10 fg/mL‑50 ng/mL，在降钙素原的临床检测中有着明显的潜在应用价值。

主权项

1.一种基于铁蛋白三维结构免疫传感器的制备方法及应用，其特征在于，包括以下步骤：（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的抗体标记的异鲁米诺‑铁蛋白‑纳米金溶液作为传感器基底材料，将其置于37 °C晾干；（3）滴加3 μL、质量分数为1 ~ 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；（4）滴加6 μL 降钙素原的标准溶液或未知浓度的降钙素原溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。