[发明专利]磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用有效
申请号: | 201910527208.1 | 申请日: | 2016-06-02 |
公开(公告)号: | CN110218712B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 刘逸寒;路福平 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;C12P13/06;C12P7/64;C12R1/84 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 栗华楠 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明属于酶的基因工程技术领域,具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变,得到活力较高的磷脂酶D基因,然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达,得到产高活力磷脂酶D的重组菌株,表达后,检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140%,高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。 | ||
搜索关键词: | 磷脂酶 突变体 及其 制备 磷脂酸 磷脂 丝氨酸 中的 应用 | ||
【主权项】:
1.一种磷脂酶D突变体,其特征在于,基于SEQ ID No.2所示的磷脂酶D氨基酸序列,发生如下突变:Asp256Thr;或Asp256Thr,Gln388Cys;或Asp256Thr,Asp519Val;或Asp256Thr,Asp519Val;或Asp256Thr,Gln388Cys,Asp519Val。
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