[发明专利]固定化酮还原酶突变体及其在制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物中的应用在审

专利信息
申请号: 201910529412.7 申请日: 2019-06-19
公开(公告)号: CN110218718A 公开(公告)日: 2019-09-10
发明(设计)人: 林涛;徐明文;蒋丽丽;于丽珺 申请(专利权)人: 南京趣酶生物科技有限公司;上海仁酶生物科技有限公司
主分类号: C12N11/10 分类号: C12N11/10;C12N9/04;C12N15/53;C12P17/06
代理公司: 南京正联知识产权代理有限公司 32243 代理人: 卢霞
地址: 210062 江苏省南京市高新区新锦*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 固定化酮还原酶突变体及其在制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物中的应用。本发明提供了固定化酮还原酶突变体,其特征在于,所述的固定化酮还原酶突变体为酮还原酶突变体的固定化细胞或固定化酶,固定化酶是所述的突变体固定化于固相支撑物上;固定化细胞是所述的酮还原酶突变体表达于固定化于固相支撑物上的微生物细胞中,所述的酮还原酶突变体选自ET016、ET017或ET031酮还原酶。本发明具有如下技术效果:1)本发明的固定化酮还原酶突变体,可作为催化剂,与辅酶再生体系共同用于制备奈必洛尔手性醇中间体及其类似物,反应转化率可达90%、95%或99%以上,产物的手性纯度值可达90%、95%或99%以上。2)固定化后的酶或细胞可以通过简单的过滤进行回收,回收后可以反复使用7‑10次,且重复使用时与初次使用的反应转化率和手性纯度值基本相同。
搜索关键词: 酮还原酶 固定化 突变体 手性醇中间体 奈必洛尔 类似物 制备 反应转化率 固定化细胞 固相支撑物 固定化酶 手性纯度 微生物细胞 辅酶再生 技术效果 突变体表 回收 催化剂 过滤 应用 细胞
【主权项】:
1.固定化酮还原酶突变体,其特征在于,所述的固定化酮还原酶突变体为酮还原酶突变体的固定化细胞或固定化酶,固定化酶是所述的突变体固定化于固相支撑物上;固定化细胞是所述的酮还原酶突变体表达于固定化于固相支撑物上的微生物细胞中;所述的酮还原酶突变体选自ET016、ET017或ET031酮还原酶;所述的ET017酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,编码所述的ET017酮还原酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述的ET016酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示,编码所述的ET016酮还原酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;所述的ET031酮还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,编码所述的ET031酮还原酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。
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