[发明专利]一种基于物理-化学双交联制备丝素蛋白-酪胺改性透明质酸水凝胶材料的方法

摘要

本发明公开了一种基于物理‑化学双交联制备丝素蛋白‑酪胺改性透明质酸水凝胶材料的方法，所述方法利用丝素蛋白和酪胺改性透明质酸(HA‑Tyr)两种基本原料，通过化学交联和物理交联相结合的方法制备得到具有可原位成胶、优良生物相容性及高强高韧的丝素蛋白‑透明质酸水凝胶。本技术方案对组织工程支架材料设计与制备具有参考意义。

主权项

1.一种基于物理‑化学双交联制备丝素蛋白‑酪胺改性透明质酸水凝胶材料的方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：1)配制丝素蛋白、酪胺改性透明质酸预聚物溶液以磷酸盐缓冲液为溶剂配制浓度为10U/ml的辣根过氧化酶溶液至完全溶解，并标记为HRP溶液，于4℃下保存；称取酪胺改性透明质酸加入HRP溶液中在室温下震荡快速溶解，于4℃下保存，然后加入丝素蛋白溶液进行轻柔混合，用旋转混匀仪进行低速搅拌混合均匀，得丝素蛋白、酪胺改性透明质酸预聚物溶液；2)制备丝素蛋白‑酪胺改性透明质酸水凝胶向步骤1)配制好的预聚溶液中添加过氧化氢溶液，预聚物溶液发生交反应，整个反应在旋转混匀仪上进行，保持反应30分钟‑40分钟，待反应结束后将反应体系置于37℃‑45℃恒温箱中静置3分钟‑5分钟，然后将交联反应后的产物取出置于离心管或24孔板中进行超声处理，超声波幅度设为40％‑50％，超声时间为16秒‑20秒，超声结束后于37℃‑45℃温度条件下静置30分钟‑40分钟以保证丝素蛋白充分结晶化，得水凝胶材料。