[发明专利]一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法

摘要

本发明属于微生物工程技术领域，尤其涉及一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法，包括以下步骤：以大豆或豆粕为原料制备大豆浆液；大豆浆液经蛋白酶适度酶解使大豆蛋白的水解度控制在10～35％；将大豆蛋白酶解物中固形物质量百分浓度调整为1～6％，添加葡萄糖或蔗糖，谷氨酸钠，用作培养枯草芽孢杆菌的培养基；将枯草芽孢杆菌种子液按1～8％的接种量接种于大豆蛋白酶解物培养基，摇床培养或发酵罐通气培养36～54h后终止发酵，收获γ‑聚谷氨酸。本发明提供的利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法能显著提高γ‑聚谷氨酸产量，且原料价廉易得，能有效降低成本，因而具有良好的应用前景。

主权项

1.一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：清洗大豆或豆粕，加入8～15倍质量的去离子水，在20～30℃浸泡4～10h，用豆浆机打浆过滤去渣，得大豆浆液；步骤二：调节步骤一得到的大豆浆液至pH值为8～11，加入碱性蛋白酶20～200万u/L，40～65℃保温酶解1～8h，控制蛋白质水解度为10～35％，然后加热灭酶活，冷却，5000r/min离心分离20min，取上清液，得大豆蛋白酶解物；步骤三：调节步骤二得到的大豆蛋白酶解物浓度，加入碳源及聚谷氨酸合成前体物质，调节pH6～8，于110～121℃灭菌20～30min后冷却至室温备用，得大豆蛋白酶解物培养基；步骤四：取枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)接种到种子液培养基，37℃摇床培养或通气培养16～24h，得枯草芽孢杆菌种子液；步骤五：将步骤四得到的枯草芽孢杆菌种子液按1～8％的接种量接种于步骤三得到的大豆蛋白酶解物培养基，33～39℃恒温摇床培养或通气培养36～54h后，终止发酵，得发酵液；步骤六：将步骤五得到的发酵液离心分离、去菌体，测定发酵液中γ‑聚谷氨酸含量。