[发明专利]一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法在审
申请号: | 201910552292.2 | 申请日: | 2019-06-25 |
公开(公告)号: | CN110243964A | 公开(公告)日: | 2019-09-17 |
发明(设计)人: | 金鹏康;任童;金鑫;石烜;池玉蕾 | 申请(专利权)人: | 西安建筑科技大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/38 |
代理公司: | 北京开阳星知识产权代理有限公司 11710 | 代理人: | 王璐 |
地址: | 710000 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及污水处理与生化分析及检测领域,公开了一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法,具体为:采用低温强酸提取微生物体内核苷酸的方式,有效提取微生物体内的核苷酸类物质,然后通过选择磷酸二氢钾浓度为5~10mM、pH值为3.9~4.1的超纯水溶液作为流动相A,磷酸二氢钾浓度为0.5M、硫酸钠浓度为0.5M、pH值为5.3~5.5的超纯水溶液作为流动相B,利用高效液相色谱结合标准曲线法进行检测及计算,实现对水处理微生物中鸟苷四磷酸含量的准确测定,为完善水处理工艺中微生物生长状态调节机制研究奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 水处理工艺 微生物 磷酸 鸟苷 超纯水溶液 磷酸二氢钾 体内 流动相 硫酸钠 微生物生长状态 高效液相色谱 水处理微生物 标准曲线法 体内核苷酸 核苷酸类 机制研究 检测领域 强酸提取 生化分析 污水处理 检测 | ||
【主权项】:
1.一种水处理工艺中微生物体内鸟苷四磷酸的HPLC检测方法,其特征在于,所述方法包括:(1)将鸟苷四磷酸标准品加水溶解,配制成不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液;(2)采用高效液相色谱分别对不同浓度的鸟苷四磷酸标准品溶液进行分析,色谱分析条件如下:流动相A为磷酸二氢钾浓度为5~10mM、pH值为3.9~4.1的超纯水溶液;流动相B为磷酸二氢钾浓度为0.5M、硫酸钠浓度为0.5M、pH值为5.3~5.5的超纯水溶液;进样并进行梯度洗脱,流动相梯度A:B由100:0到0:100,流速为0.8mL/min;以鸟苷四磷酸标准品溶液的浓度为横坐标,以测得的色谱主峰面积为纵坐标,绘制色谱主峰面积随鸟苷四磷酸浓度变化的标准曲线,得到线性方程;(3)利用甲酸裂解待测微生物,提取待测微生物体内的鸟苷四磷酸,得到待测样品溶液,采用高效液相色谱对所述待测样品溶液进行分析,色谱分析条件与步骤(2)相同;(4)根据步骤(3)分析得到的所述待测样品溶液的色谱主峰面积,代入步骤(2)确定的标准曲线的线性方程,即可计算得到待测样品溶液的鸟苷四磷酸浓度,进而对待测微生物体内的鸟苷四磷酸进行定性和定量。
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