[发明专利]一种猪源产气荚膜梭菌致病性试验方法在审
| 申请号： | 201910557213.7 | 申请日： | 2019-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN110241188A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 郝海红;袁宗辉;罗讯;徐紫慧;黄玲利;王玉莲;彭大鹏;王旭;陈冬梅;陶燕飞;潘源虎;谢书宇;程古月;瞿玮;刘振利;谢长清;房诗薇;黄啸 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/04;A61K49/00 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 戴凤仪 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪源产气荚膜梭菌致病性试验方法，属于生物技术领域。所述方法包括攻毒菌株的增菌传代培养，试验动物的攻毒和观察以及细菌的分离与鉴定三部分。其中细菌增菌培养基选择液体硫乙醇酸盐培养基(FT)，传代培养基选择强化布氏血琼脂培养基，可有效增加细菌攻毒菌数量并且缩短细菌培养时间。攻毒方式为攻毒菌液腹腔注射法，攻毒8h后即观察到动物的发病和死亡现象。解剖发病及死亡动物病变组织，接种于选择性培养基胰胨‑亚硫酸盐‑环丝氨酸琼脂基础(TSC)进行分离培养，挑取菌落形态明确的单菌落，接种于FT中进行增菌培养，使用多重PCR方法鉴定分离细菌。所述方法简单且成本低，试验方法可行，试验结果准确可靠。 | ||
| 搜索关键词： | 产气荚膜梭菌 致病性试验 细菌 种猪 接种 生物技术领域 选择性培养基 血琼脂培养基 传代 腹腔注射法 培养基选择 增菌培养基 病变组织 传代培养 方法鉴定 分离培养 分离细菌 菌落形态 琼脂基础 试验动物 死亡动物 死亡现象 细菌培养 亚硫酸盐 乙醇酸盐 增菌培养 培养基 多重PCR 单菌落 丝氨酸 液体硫 布氏 观察 胰胨 增菌 解剖 试验 | ||
【主权项】：
1.一种猪源产气荚膜梭菌的致病性试验方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)攻毒菌株的增菌及传代培养：将猪源产气荚膜梭菌置于FT肉汤中复苏，平板划线于强化布氏血琼脂培养基上传代培养，挑单菌落于FT培养基中增菌培养，得增菌培养液；(2)攻毒与观察：取所述增菌培养液腹腔注射试验动物，观察动物的发病及死亡情况；(3)攻毒菌株的分离与鉴定：对发病和死亡动物病变部位进行解剖，涂布于选择培养基中分离，并对分离株进行鉴定，当鉴定结果与攻毒菌株相同时，可判定攻毒菌株为致病性产气荚膜梭菌。
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