[发明专利]一种基于双酶偶联的谷氨酰胺检测方法有效
| 申请号： | 201910560689.6 | 申请日： | 2019-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN110186892B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 朱志强;金晨 | 申请（专利权）人： | 苏州健雄职业技术学院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/533;G01N33/535;C12Q1/28;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙) 32267 | 代理人： | 刘燕娇 |
| 地址： | 215411 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明采用G‑四联体‑Hemin过氧化物模拟酶和谷氨酰胺合成酶双酶偶联体系，利用谷氨酸合成酶的选择性，特异性的识别谷氨酰胺，将谷氨酰胺定量转化为荧光信号，通过标准曲线的方法测定样品中谷氨酰胺的含量，本测定方法操作方便、成本低、快速准确、灵敏度高且对样本的损伤较小，可以广泛的应用于生物、农业等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 双酶偶联 谷氨酰胺 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于双酶偶联的谷氨酰胺检测方法，其特征在于，包含以下步骤：（1）将富含有鸟嘌呤的单链DNA和富含有腺嘌呤的单链DNA分别溶解于TE缓冲液中，4℃保存，得DNA溶液A和DNA溶液B；（2）血红素经二甲亚砜溶解后，4℃存放于磷酸钾缓冲溶液，得血红素溶液；（3）将DNA溶液A与DNA溶液B以及血红素溶液混合，室温静置30‑60分钟后得DNA模拟酶溶液，4℃保存；（4）配制谷氨酰胺合成酶工作溶液，谷氨酰胺标准溶液和荧光试剂溶液；（5）待测样品取样后加入酶标板加样孔中，谷氨酰胺标准溶液加入同一酶标板的其他加样孔中；（6）向上述酶标板的加样孔加入谷氨酰胺合成酶工作溶液，孵育0.5‑1.5小时；（7）向上述酶标板的加样孔加入DNA模拟酶溶液和荧光试剂溶液，孵育1‑2小时；（8）用酶标仪在530nm激发，在590nm检测荧光信号，根据谷氨酰胺标准溶液的浓度和信号绘制标准曲线，根据标准曲线算出样品浓度。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于苏州健雄职业技术学院，未经苏州健雄职业技术学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910560689.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
