[发明专利]丹参细胞色素P450基因CYP72A395的基因克隆引物、表达载体、催化功能及应用有效

专利信息
申请号: 201910571191.X 申请日: 2019-06-28
公开(公告)号: CN112143742B 公开(公告)日: 2022-08-09
发明(设计)人: 罗红梅;张建红;徐志超;宋经元 申请(专利权)人: 中国医学科学院药用植物研究所
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N9/02;C12N15/82;A01H5/06;A01H6/00
代理公司: 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 代理人: 李冉
地址: 100193 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列;本发明所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP72A395的转录表达谱,发现其在丹参花和根周皮高丰度表达;构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体,通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系;化学检测分析发现,在CYP72A395‑RNAi株系中,丹参酮类化合物含量升高,而在CYP72A395‑oe株系中,丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能,可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路,并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。
搜索关键词: 丹参 细胞 色素 p450 基因 cyp72a395 克隆 引物 表达 载体 催化 功能 应用
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