[发明专利]一种蓝莓多倍体的培养方法

摘要

本发明属于果树生物技术领域，公开了一种蓝莓多倍体的培养方法。本发明以蓝莓品种“顶级”为研究材料，采用浸渍法，研究不同的加倍处理方式对多倍体形成产生的影响。在经过外植体的灭菌、初代培养、试验材料的加倍处理、继代培养、生根培养，建立起植株再生体系，并采用染色体计数法鉴定再生植株的倍数，最终建立起具有体系稳定、诱导效率高、环境友好等优点的蓝莓优良品种“顶级”的多倍体培养的技术体系，为蓝莓多倍体育种奠定基础。

主权项

1.一种蓝莓多倍体的培养方法，其特征是，包括以下步骤：S1.外植体的灭菌；将生长健壮的蓝莓的单芽茎段，转入灭菌剂中，于28℃，180r/min条件下摇床振荡处理10min，再用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干表面水分；S2.初代培养；将上述经过灭菌的单芽茎段接种在初代培养基上，培养条件为：温度24～26℃，每日日光灯光照16h，光强2000～2500lx，培养30‑40天；S3.加倍处理将初代培养发出的嫩梢剪成单芽茎段，将其浸泡在经高压灭菌的0.05％‑0.3％秋水仙素水溶液中，在该溶液中附加有0.1～0.5％尿素和0.1～0.5％硫代硫酸钠，然后放在摇床上以100r/min震荡，处理时间为6‑72h，在超净工作台上将材料从秋水仙素水溶液中取出，无菌水冲洗3次，用无菌滤纸吸干表面水分后，备用；S4.继代培养将单芽茎段转接到继代培养基中，培养条件为：温度24～26℃，每日日光灯光照16h，光强2000～2500lx，培养30‑40d；S5.生根培养待处理的腋芽萌动抽茎长至1～2cm后继代到新鲜的生根培养基中，培养条件为：温度24～26℃，每日日光灯光照16h，光强2000～2500lx，培养30‑40d；S6.组培苗的倍性鉴定生根培养后取茎尖或根尖进行染色体数目鉴定。