[发明专利]一种分离提取高纯度两性霉素B的方法在审
| 申请号： | 201910593800.1 | 申请日： | 2019-07-03 |
| 公开（公告）号： | CN110467645A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 柳志强;张博;郑裕国;陈燏;张雨涵;姜圣贤;黄恺 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C07H17/08 | 分类号： | C07H17/08;C07H1/06 |
| 代理公司： | 33246 浙江千克知识产权代理有限公司 | 代理人： | 冷红梅<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 310000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种分离提取高纯度两性霉素B的方法。将烘干含有两性霉素B的菌丝体投入萃取罐并加入甲醇和盐酸水溶液调至PH＝3.0溶解两性霉素B，抽滤得到两性霉素B的提取液并过膜除去热源和大分子物质，然后在两性霉素B提取液中加入水和碱液调至PH＝6.0使其结晶沉淀，过滤得沉淀并干燥后获得高纯度两性霉素B固体。本发明采用固液分离去除发酵液中的杂质，提高了产品质量。通过超滤膜过滤热源和大分子物质和杂蛋白后进一步去除杂质，提高净化液质量。最后通过洗涤再次去除杂质，从而获得高纯度产品。所得产品颜色为浅黄色，纯度高，两性霉素B产品纯度为93％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 两性霉素B 去除 大分子物质 高纯度 提取液 热源 超滤膜过滤 高纯度产品 盐酸水溶液 产品纯度 产品颜色 分离提取 固液分离 结晶沉淀 发酵液 净化液 菌丝体 杂蛋白 萃取罐 抽滤 烘干 甲醇 碱液 洗涤 沉淀 过滤 溶解 | ||
【主权项】：
1.一种分离提取高纯度两性霉素B的方法，所述方法包括：/n(1)将含有两性霉素B的发酵液固液分离得到两性霉素B菌丝体，烘干得到菌丝体；/n(2)烘干后的菌丝体投入萃取罐，加入甲醇，温度降至2～10℃，调节pH至3.0～4.0，搅拌1～2小时后固液分离，得到提取液；/n(3)提取液通过截留分子量为5000～30000 Da的超滤膜，除去热源、杂蛋白和色素等大分子量杂质后得到两性霉素B净化液；/n(4)两性霉素B净化液加入结晶罐，调节pH至5.0～6.5，升温至20～25℃，保温1～2小时待结晶完成，固液分离，得到高纯度两性霉素B结晶粉；/n(5)两性霉素B结晶粉加入甲醇洗涤，洗涤后固液分离烘干粉碎得到两性霉素B成品。/n
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