[发明专利]多重PCR检测转基因大豆的引物组合、试剂盒及应用

摘要

本发明公开了多重PCR检测转基因大豆的引物组合、试剂盒及应用，具体的，引物组合包括内参引物GmActin11 F和GmActin11 R；外源基因引物G2‑EPSPS F，G2‑EPSPS R，GAT F和GAT R；侧翼序列引物ZH10P1，GAT‑2，G2‑EPSPS‑2和ZH10P2；及包括上述引物组合的试剂盒；应用方法包括PCR具体反应体系与条件。本发明具有经济、快速、操作简单等优点，灵敏度达0.5％，符合欧盟有关转基因产品标识的要求，可以用于转基因大豆ZH10‑6及其衍生品系的检测。

主权项

1.一种多重PCR检测转基因大豆的引物组合，其特征在于，包括5对特异性引物：内参引物GmActin11 F和GmActin11 R；外源基因引物G2‑EPSPS F，G2‑EPSPS R，GATF和GATR；侧翼序列引物ZH10P1，GAT‑2，G2‑EPSPS‑2和ZH10P2；所述内参引物为：GmActin11F：5’‑ATCTTGACTGAGCGTGGTTATTCC‑3’(SEQ ID No.1)；GmActin11R：5’‑GCTGGTCCTGGCTGTCTCC‑3’(SEQ ID No.2)；所述外源基因G2‑EPSPS引物为：G2EPSPS‑F：5’‑CAAATCCATTACCAACCGTGC‑3’(SEQ ID No.3)；G2EPSPS‑R：5’‑ACCACCATCAATCTCGAAACG‑3’(SEQ ID No.4)；所述外源基因GAT引物为：GAT‑F：5’‑CTCAGACCAAACCAGCCGATAG‑3’(SEQ ID No.5)；GAT‑R：5’‑GTGTCGAATACCTCTCCCTGCTC‑3’(SEQ ID No.6)；所述侧翼序列ZH10/GAT引物为：ZH10P1：5’‑TAATAGTAGAATGGGACTGGTGGAT‑3’(SEQ ID No.7)；GAT‑2：5’‑GCGGACTTGCTTTGGTGTAAT‑3’(SEQ ID No.8)；所述侧翼序列G2/ZH10引物为：G2EPSPS‑2：5’‑CCCGAATCATCAGGCAAACA‑3’(SEQ ID No.9)；ZH10P2：5’‑AACACATCATAGTATTCTAAAACGCTT‑3’(SEQ ID No.10)。