[发明专利]一种高效快速筛选基因调控区域中功能位点的方法及应用在审
| 申请号： | 201910601762.X | 申请日： | 2019-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN110331169A | 公开（公告）日： | 2019-10-15 |
| 发明（设计）人： | 亢庆铮;亢梦晓;王福芳;张亮 | 申请（专利权）人： | 亢庆铮 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 459000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效快速筛选基因非编码调控区域中功能位点的方法及应用。本发明将Cre/lox和CRISPR/Cas9技术结合，将体外构建外源突变引入到基因组内，达到原位突变的效果，从而来对基因非编码区域（如增强子等）的功能位点进行高效和快速的筛选。通过CRISPR/Cas9技术在基因组中调控区域引入点突变，虽然可以达到原位突变的效果，但其后期筛选的工作量大，另外有些突变位点的并不适合sgRNA的设计，受PAM序列的区域限制。本发明突破了上述限制，可在基因调控区域内任意位点进行点突变。另外本技术可同时引入两个或多个位点的突变，以及基因调控区域内特定序列的切除，大大降低了基因非编码调控区域研究的难度。 | ||
| 搜索关键词： | 调控区域 突变 功能位 高效快速 基因调控 筛选基因 非编码 基因组 筛选 非编码区域 技术结合 区域限制 体外构建 突变位点 基因 点突变 引入点 增强子 引入 个位 外源 位点 工作量 切除 应用 研究 | ||
【主权项】：
1.一种高效快速筛选基因调控区域中功能位点的方法，其特征在于：将Cre/lox和CRISPR/Cas9技术结合，将外源构建的突变引入到基因组内，达到原位突变的效果，同时也可进行多位点同时突变，从而来对基因非编码区域的功能位点进行高效和快速的筛选。
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