[发明专利]一种低黏度岩藻聚糖及其高温高压-酶联耦合制备方法

摘要

本发明属于生物制剂领域，公开了一种低黏度岩藻聚糖及其高温高压‑酶联耦合制备方法，该方法包括：(1)将高聚态岩藻聚糖水溶液进行高温高压处理，得预水解溶液；(2)S1、将扇贝内脏和/或鲍鱼内脏经组织匀浆后加入磷酸盐缓冲溶液，浸提，冷冻离心并收集上清液，往上清液中加入硫酸铵并静置反应，冷冻离心并收集上清液，往上清液中加入硫酸铵，将所得沉淀物溶解后进行超滤膜过滤，冷冻干燥，得岩藻聚糖裂解酶；S2、将岩藻聚糖裂解酶与β‑半乳糖苷酶、β‑葡萄糖苷酶、碱性蛋白酶和果胶酶混合得复合水解酶；S3、将预水解溶液在复合水解酶作用下进行酶解。采用本发明提供的方法制备低黏度岩藻聚糖，酶解效率高，硫酸基团保留度≥90％，回收率≥90％。

主权项

1.一种高温高压‑酶联耦合制备低黏度岩藻聚糖的方法，其特征在于，该方法包括：(1)预水解处理：将高聚态岩藻聚糖溶解于水中，并将所得高聚态岩藻聚糖水溶液进行高温高压处理，得到预水解岩藻聚糖溶液；(2)制备低黏度岩藻聚糖：S1、制备岩藻聚糖裂解酶：将扇贝内脏和/或鲍鱼内脏进行组织匀浆，往所得匀浆液中加入磷酸盐缓冲溶液之后于0～10℃下浸提，冷冻离心并收集上清液，接着往所得一次离心上清液中加入硫酸铵使硫酸铵的浓度为20～40％w/v并于0～10℃下静置反应0.5～10h，再次冷冻离心并收集上清液，接着往所得二次离心上清液中加入硫酸铵使硫酸铵的浓度为60～90％w/v，收集沉淀物，将所得沉淀物用乙酸缓冲液溶解之后进行超滤膜过滤以除去硫酸铵盐，所得浓缩液经冷冻干燥后得到岩藻聚糖裂解酶；S2、制备复合水解酶：将所述岩藻聚糖裂解酶与β‑半乳糖苷酶、β‑葡萄糖苷酶、碱性蛋白酶和果胶酶混合得到复合水解酶；S3、酶解：将所述预水解岩藻聚糖溶液在所述复合水解酶的作用下进行酶解，得到低黏度岩藻聚糖溶液。