[发明专利]一种基因重组蛋白Tat-hMsrA的生产方法有效
申请号: | 201910616432.8 | 申请日: | 2019-07-09 |
公开(公告)号: | CN110387380B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 曾建华;闫云云;胡雪平 | 申请(专利权)人: | 武汉华肽生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N9/02;C12R1/125 |
代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 严超 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新大道*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种基因重组蛋白Tat‑hMsrA的生产方法,其包括如下步骤:构建含融合蛋白Trx‑Tat‑hMsrA的重组质粒;将重组质粒电转化至宿主枯草芽孢杆菌中,进行菌株培养,获取阳性表达菌;将阳性表达菌进行诱导培养,获得含Tat‑hMsrA的表达产物液,酶切,复性,纯化,即得。该基因重组蛋白Tat‑hMsrA的生产方法可获得活性较高的Tat‑hMsrA。 | ||
搜索关键词: | 一种 基因 重组 蛋白 tat hmsra 生产 方法 | ||
【主权项】:
1.一种基因重组蛋白Tat‑hMsrA的生产方法,其特征在于,包括如下步骤:构建含信号肽SacB基因、融合蛋白Trx‑Tat‑hMsrA以及酶切位点EcoR I和BamH I的目的基因;将所述目的基因和穿梭载体pGJ148分别用EcoR I和BamH I双酶切,胶回收后,经T4连接酶作用,获得连接产物,并将连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α中,提取重组质粒;将所述重组质粒电转化至宿主枯草芽孢杆菌中,进行菌株培养,获取阳性表达菌;将所述阳性表达菌进行诱导培养,获得含Tat‑hMsrA的表达产物液;将所述含Tat‑hMsrA表达产物液进行酶切,得酶切产物液;将所述酶切产物液进行复性,得复性混合物;将所述复性混合物纯化,即得。
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